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通派(上海)生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第13年

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ATCC細(xì)胞
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核酸載體轉(zhuǎn)染細(xì)胞HSP90β蛋白的表達(dá)(786-O細(xì)胞庫)

時(shí)間:2018/8/30閱讀:841
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核酸載體轉(zhuǎn)染細(xì)胞HSP90β蛋白的表達(dá)(786-O細(xì)胞庫)  通派細(xì)胞庫擁有專業(yè)的細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)人員,以專業(yè)的技術(shù)支撐產(chǎn)品,提供高質(zhì)量的細(xì)胞產(chǎn)品;以、無污染、狀態(tài)佳為前提,優(yōu)惠的價(jià)格供應(yīng)給廣大科研人員,專業(yè)的細(xì)胞售前,滿意的細(xì)胞售后。

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溫馨提示:網(wǎng)上發(fā)布有關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)文章與產(chǎn)品無關(guān),所需細(xì)胞對(duì)應(yīng)來源、說明、資料索取等具體問題請(qǐng)咨詢管理員;

常見細(xì)胞問題咨詢:(細(xì)胞培養(yǎng)等問題請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫管理員)

1、細(xì)胞復(fù)蘇、凍存的操作流程,以及凍存液的配制比例?

2、凍存細(xì)胞大概需要多少細(xì)胞,下次才能傳代?  

3、hBMSC培養(yǎng)基要求、血清要求、傳代換液要求等?

4、小鼠腎足細(xì)胞(含tsSV40T序列)細(xì)胞是永生化培養(yǎng)的細(xì)胞嗎?有無發(fā)表sci文章的case?

了解HSP90β反義核酸轉(zhuǎn)染細(xì)胞中HSP90β蛋白的表達(dá)。

通過lipofectamine介導(dǎo)將HSP90β反義核酸重組子pcDNA-HSP90轉(zhuǎn)染人胃癌細(xì)胞系SGC7901、人胃癌多藥耐藥細(xì)胞系SGC7901/VCR、人肝癌細(xì)胞系HCC7402及人食管癌細(xì)胞系Ec109。

(HBZY-1細(xì)胞:貼壁細(xì)胞     通派細(xì)胞庫培養(yǎng)條件:90%  低糖DMEM、10% FBS)

經(jīng)用G418進(jìn)行篩選,對(duì)篩選出的陽性克隆用western blot檢測(cè)HSP90β蛋白的表達(dá)。

結(jié)果:pcDNA-HSP90轉(zhuǎn)染人胃癌細(xì)胞系SGC7901,人胃癌耐藥細(xì)胞系SGC7901/VCR,人肝癌細(xì)胞系HCC7402及人食管癌細(xì)胞系Ec109后,用G418篩選出的陽性克隆,分別被命名為:AH-SGC7901,AH-SGC7901/VCR,AH-HCC7402及AH-Ec109。

(HBMEC細(xì)胞:貼壁細(xì)胞     通派細(xì)胞庫培養(yǎng)條件:90% DMEM、10% FBS)

Westernblot檢測(cè)結(jié)果表明,AH-SGC7901,AH-SGC7901/VCR,AH-HCC7402及AH-Ec109表達(dá)的HSP90β蛋白低于其親本細(xì)胞。

(HConEpic細(xì)胞:貼壁細(xì)胞     通派細(xì)胞庫培養(yǎng)條件:90%  高糖DMEM、10% FBS)

結(jié)論:HSP90β反義核酸可封閉HSP90βmRNA,使pcDNA-HSP90轉(zhuǎn)染的細(xì)胞AH-SGC7901,AH-SGC7901/VCR,AH-HCC7402及AH-Ec109表達(dá)的HSP90β蛋白減少,為研究HSP90下調(diào)對(duì)腫瘤細(xì)胞生 物學(xué)活性的影響提供了實(shí)驗(yàn)材料。

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