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常見細(xì)胞問題咨詢：（細(xì)胞培養(yǎng)等問題請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫管理員）

1、細(xì)胞復(fù)蘇、凍存的操作流程，以及凍存液的配制比例？

2、凍存細(xì)胞大概需要多少細(xì)胞，下次才能傳代？  

3、hBMSC培養(yǎng)基要求、血清要求、傳代換液要求等？

4、小鼠腎足細(xì)胞（含tsSV40T序列）細(xì)胞是永生化培養(yǎng)的細(xì)胞嗎？有無發(fā)表sci文章的case？

一個(gè)重要的科學(xué)謎團(tuán)就是未成熟造血干細(xì)胞如何（和為什么）啟動(dòng)形成某種細(xì)胞所需的基因表達(dá)，而不是向著另外一條路線發(fā)展。知道這個(gè)控制關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子的路線對(duì)了解不同干細(xì)胞如何形成特定細(xì)胞具有重要意義。 

CCD-18Co細(xì)胞：貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫培養(yǎng)條件：90% DMEM高糖、10% FBS

研究組利用他們和氣體研究人員的研究發(fā)現(xiàn)構(gòu)建了這樣的一個(gè)系統(tǒng)。該研究組之前確定出轉(zhuǎn)錄因子PU.1是觸發(fā)骨髓祖細(xì)胞發(fā)育的一個(gè)關(guān)鍵基因開關(guān)。

BJ細(xì)胞：貼壁細(xì)胞    通派細(xì)胞庫培養(yǎng)條件：90%  DMEM高糖、10% FBS

氣體的研究人員確定出一個(gè)叫做C/EBPα的轉(zhuǎn)錄因子是另外的一個(gè)發(fā)育開關(guān)。 但是這兩個(gè)開關(guān)如何工作還不清楚。這種轉(zhuǎn)錄因子在巨噬細(xì)胞和嗜中性粒細(xì)胞中的水平都很高。它們似乎都能直接活化巨噬細(xì)胞或嗜中性粒細(xì)胞的基因。

BGC-823細(xì)胞：貼壁細(xì)胞    通派細(xì)胞庫培養(yǎng)條件：90%  RPMI-1640、10% FBS 

嗜中性粒細(xì)胞中的巨噬細(xì)胞基因也處于關(guān)閉狀態(tài)。那么，這些巨噬細(xì)胞和嗜中性粒細(xì)胞基因如何利用相同的一套基本調(diào)節(jié)因子來產(chǎn)生特定的基因表達(dá)模式呢？ 

BeWo細(xì)胞：貼壁細(xì)胞    通派細(xì)胞庫培養(yǎng)條件：90%  F12K、10% FBS 

為了回答這個(gè)問題，研究人員利用缺少PU.1的小鼠祖細(xì)胞來揭開這個(gè)謎底。他們通過引入不同量的PU.1來操縱這些細(xì)胞的決策機(jī)器。 Beta-TC-6細(xì)胞：貼壁細(xì)胞    通派細(xì)胞庫培養(yǎng)條件：80%  DMEM、10% FBS 

當(dāng)研究人員引入低濃度的PU.1時(shí)，他們發(fā)現(xiàn)細(xì)胞能同時(shí)活化巨噬細(xì)胞和嗜中性粒細(xì)胞基因。這點(diǎn)發(fā)現(xiàn)非常重要，因?yàn)樗C實(shí)了這種混合的細(xì)胞血統(tǒng)模式如何被建立。 

BEND.3細(xì)胞：貼壁細(xì)胞    通派細(xì)胞庫培養(yǎng)條件：90%  DMEM高糖、10% FBS 

他們發(fā)現(xiàn)，當(dāng)增加PU.1（能誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞分化）的濃度時(shí)，細(xì)胞首先經(jīng)歷一種過度態(tài)的混合性細(xì)胞血統(tǒng)狀態(tài)，但之后會(huì)觸發(fā)新的、能抑制嗜中性粒細(xì)胞基因的調(diào)節(jié)蛋白并活化巨噬細(xì)胞基因。

研究人員確定出了在嗜中性粒細(xì)胞分化過程中能關(guān)閉巨噬細(xì)胞基因的對(duì)應(yīng)抑制蛋白。