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常見細(xì)胞問題咨詢：（細(xì)胞培養(yǎng)等問題請咨詢細(xì)胞庫管理員）

1、細(xì)胞復(fù)蘇、凍存的操作流程，以及凍存液的配制比例？

2、凍存細(xì)胞大概需要多少細(xì)胞，下次才能傳代？  

3、hBMSC培養(yǎng)基要求、血清要求、傳代換液要求等？

4、小鼠腎足細(xì)胞（含tsSV40T序列）細(xì)胞是永生化培養(yǎng)的細(xì)胞嗎？有無發(fā)表sci文章的case？

實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，只有那些約3.5天后感染的細(xì)胞會產(chǎn)生IL-10。隨后的實(shí)驗(yàn)表明，本質(zhì)上，暴露于病毒是沒有必要的，而是幾輪復(fù)制和增殖(約3天)能夠產(chǎn)生IL-10。

研究表明，無論是在體外條件下獨(dú)立的感染下，還是在體內(nèi)感染過程中，NK細(xì)胞的廣泛增殖與IL-10產(chǎn)生有關(guān)；

（143B細(xì)胞：貼壁細(xì)胞    通派細(xì)胞庫培養(yǎng)條件：90% RPMI-1640、10% FBS）

IL-10的產(chǎn)生是與NK細(xì)胞的增殖有關(guān)，觸發(fā)開關(guān)產(chǎn)生IL-10的NK細(xì)胞的機(jī)制。在感染的小鼠中，對NK細(xì)胞增殖前和后的全基因組的構(gòu)象進(jìn)行比較。

發(fā)現(xiàn)NK細(xì)胞尚未發(fā)生增殖過程時(shí)，IL-10基因被緊緊地包裹起來，而無法進(jìn)行表達(dá)。細(xì)胞進(jìn)行增殖時(shí)的IL-10基因被打開使其更容易表達(dá)。

（HEK-293細(xì)胞：貼壁細(xì)胞    通派細(xì)胞庫培養(yǎng)條件：90% DMEM、10% FBS）

當(dāng)?shù)玫竭@些結(jié)果時(shí)，大家都非常興奮，因?yàn)樵隗w內(nèi)的感染過程中，從一個(gè)細(xì)胞群中挖掘表觀遺傳改變是相當(dāng)不俗的。

由于在在NK細(xì)胞的全基因組中的DNA研究表觀遺傳，而不僅僅是在IL-10基因中，研究人員現(xiàn)在可以返回尋找其他的增殖引起變化的數(shù)據(jù)中。這可能會告訴他們增殖是否改變NK細(xì)胞的其他重要功能。

（293FT細(xì)胞：貼壁細(xì)胞    通派細(xì)胞庫培養(yǎng)條件：90% 高糖DMEM、10% FBS）

這是*有可能其他的變化在進(jìn)行，以及它可能被用于其他目的，這也是NK細(xì)胞為什么增殖的一個(gè)答案。