U14細(xì)胞(小鼠U14細(xì)胞)
通派細(xì)胞庫作為國內(nèi)專業(yè)培養(yǎng)細(xì)胞中心,供應(yīng):肝癌細(xì)胞、直腸癌細(xì)胞、胚腎細(xì)胞、肺癌細(xì)胞、肝細(xì)胞、靜脈內(nèi)皮細(xì)胞、鼻咽癌細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等。
信息發(fā)布數(shù)量有限,為了您可以及時(shí)了解您所需要的細(xì)胞信息,建議直接細(xì)胞管理員,獲取U14細(xì)胞培養(yǎng)說明書、U14細(xì)胞價(jià)格、U14細(xì)胞培養(yǎng)條件、U14細(xì)胞培養(yǎng)操作注意事項(xiàng)等問題。
貼壁細(xì)胞操作流程:(貼壁細(xì)胞生長緩慢)
1)適當(dāng)提高血清濃度(zui高不能超過20%)。
2)根據(jù)該細(xì)胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)。
貼壁細(xì)胞操作流程:(生長不均)
貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)
U14細(xì)胞(小鼠U14細(xì)胞) 細(xì)胞包裝:
復(fù)蘇細(xì)胞(T25培養(yǎng)瓶×1 常溫運(yùn)輸)
凍存細(xì)胞(凍存管、干冰包裝低溫運(yùn)輸)
新聞:
采用RT-PCR方法從人外周血白細(xì)胞總RNA中釣取人可溶性b淋巴細(xì)胞刺激因子的cDNA片段, 再運(yùn)用基因重組手段, 利用通用型質(zhì)粒pBV220構(gòu)建表達(dá)載體pBV220/hsBLyS.
經(jīng)測序鑒定后, 以之為模板使用重疊PCR法擴(kuò)增得到hsBLyS的兩個(gè)點(diǎn)突變體hsBY-A(Cys146→Ala146) 和hsBY-V (Cys146→Val146)的基因片段, 構(gòu)建表達(dá)載體pBV220/hsBY-A及pBV220/hsBY-V.
經(jīng)測序無誤后, 將上述3種載體分別轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α并誘導(dǎo)重組蛋白質(zhì)表達(dá), 薄層掃描結(jié)果顯示3種蛋白質(zhì)在DH5α中表達(dá)量都在20%~30%之間.
再分別運(yùn)用變性、 凝膠過濾層析及復(fù)性等手段純化目的蛋白質(zhì), zui后通過B淋巴細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)檢測純化產(chǎn)物促人B細(xì)胞增殖的活性.
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明, 3種重組蛋白質(zhì)都能明顯刺激人B細(xì)胞增殖;
統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)顯示, 突變體rhsBY-V較野生型rhsBLyS的促人B淋巴細(xì)胞增殖活性顯著增強(qiáng).
U14細(xì)胞(小鼠U14細(xì)胞)