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ATCC細(xì)胞
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Hela細(xì)胞株
胚胎成纖維細(xì)胞

HCT-8細(xì)胞來源

時間:2016/5/10閱讀:950
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哺乳細(xì)胞的細(xì)胞核是一個高度復(fù)雜的自組裝結(jié)構(gòu),染色質(zhì)是其主要成分。

已有大量證據(jù)表明基因表達(dá)調(diào)控過程經(jīng)常伴隨著染色質(zhì)結(jié)構(gòu)的動態(tài)變化,這可能是基因表達(dá)調(diào)控的一個更的層面。

以轉(zhuǎn)錄工廠(transcription factory)模型為例,該模型zui早在1993年提出,基于電鏡和免疫熒光的數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)大量RNA Pol-II集合的位點,多個基因被招募到這些轉(zhuǎn)錄工廠共轉(zhuǎn)錄。

然而到目前為止這個模型還存在很大爭議,zui主要的原因是研究手段的限制。之前的數(shù)據(jù)主要依賴于電鏡和熒光顯微鏡,電鏡雖然分辨率高,但沒有動態(tài)信息;

熒光顯微鏡則沒有足夠的分辨率。實現(xiàn)對轉(zhuǎn)錄工廠RNA Pol II cluster的動態(tài)定量觀測對其機(jī)理的研究有重要意義。

通過發(fā)展和應(yīng)用貝葉斯超分辨率顯微技術(shù),在活細(xì)胞的細(xì)胞核內(nèi)原位觀察到了單個轉(zhuǎn)錄工廠的組裝和解聚的動態(tài)過程,并且測量了活細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)錄工廠的數(shù)目和大小隨時間以及細(xì)胞環(huán)境的影響。

揭示了轉(zhuǎn)錄工廠產(chǎn)生和消失的異質(zhì)性,支持了轉(zhuǎn)錄工廠產(chǎn)生的on-demand模型,證明了轉(zhuǎn)錄工廠在pre-elongation phase招募Pol II 分子。這一成像分析方法也可以應(yīng)用到其他納米尺度的活細(xì)胞核內(nèi)動態(tài)觀測研究中。

 

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