A2780細(xì)胞 cDNA文庫不同于基因組文庫，被克隆DNA是從mRNA反轉(zhuǎn)錄來源的DNA。CDNA組成特點(diǎn)是其中不含有內(nèi)含子和其他調(diào)控序列。從而做cDNA克隆時(shí)應(yīng)是先從獲得mRNA開始，在此基礎(chǔ)上，通過反轉(zhuǎn)錄酶作用產(chǎn)生一條與mRNA相互補(bǔ)的DNA鏈，然后除掉mRNA，以*條DNA鏈為模板復(fù)制出第二條DNA鏈（雙鏈）；再進(jìn)一步把此雙鏈插入原核或真核載體。
細(xì)胞庫細(xì)胞種類齊全，上信息發(fā)布數(shù)量有限，為了能及時(shí)快速確認(rèn)您所需要的細(xì)胞是否提供，請*時(shí)間細(xì)胞庫管理員：（，）
A2780細(xì)胞 反轉(zhuǎn)錄酶催化合成cDNA
1．在置于冰上的無菌微量離心管內(nèi)混合下列試劑進(jìn)行cDNA*鏈的合成：
poly(A)+RNA (1μg/μl) 10μl
寡核苷酸引物(1μg/μl) 1μl
1mol/L Tris-HCl (pH8.0, 37℃) 2.5μl
1mol/L KCl 3.5μl
250 mmol/L MgCl2 2μl
dNTP溶液（含4種dNTP，每種5mmol/L） 10μl
0.1 mol/L DTT 2μl
RNase抑制劑（選用） 25單位
加H2O至 48μl
2．當(dāng)所有反應(yīng)組在0℃混合后，取出2.5μl反應(yīng)液轉(zhuǎn)移到另一個(gè)0.5ml微量離心管內(nèi)。在這個(gè)小規(guī)模反應(yīng)管中加入0.1μl [α-32P] dCTP（400 Ci/mmol, 10mCi/ml）。
3．大規(guī)模和小規(guī)模反應(yīng)管都在37℃溫育1h。
4．溫育接近結(jié)束時(shí)，在含有同位素的小規(guī)模反應(yīng)管中加入1μl 0.25mol/L EDTA，然后將反應(yīng)管轉(zhuǎn)移到冰上。大規(guī)模反應(yīng)管則在70℃溫育10 min，然后轉(zhuǎn)移至冰上。
5．參考《分子克隆實(shí)驗(yàn)指南》第三版附錄8所述方法，測定0.5μl小規(guī)模反應(yīng)物中放射性總活度和可被三（TCA）沉淀的放射性活度。此外，用合適的DNA分子質(zhì)量參照物通過堿性瓊脂糖凝膠電泳對小規(guī)模反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)行分析是值得的。
6．按下述方法計(jì)算cDNA*鏈的合成量（推算方法略）：
[摻入的活度值(cpm)/總活度值]×66(μg)=合成的cDNA*鏈(μg)
7．盡可能快地進(jìn)行cDNA合成的下一步驟。
人肺腺癌細(xì)胞 SPC-A1細(xì)胞 規(guī)格（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
人肺癌細(xì)胞 A549細(xì)胞 規(guī)格（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 H125細(xì)胞 規(guī)格（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
人肺癌細(xì)胞 H1299細(xì)胞 規(guī)格（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
人肺癌細(xì)胞 TKB-1細(xì)胞 規(guī)格（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
人肺腺癌細(xì)胞，LTEP-a-2細(xì)胞 規(guī)格（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
人肺腺癌細(xì)胞，Lu-165細(xì)胞 規(guī)格（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞，NCI-H460細(xì)胞 規(guī)格（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
人肺腺癌細(xì)胞，SPC-A-1細(xì)胞 規(guī)格（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞，095-D細(xì)胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
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人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞，NCI-H661細(xì)胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
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人支氣管上皮樣細(xì)胞，BEAS-2B細(xì)胞
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人乳腺癌細(xì)胞，MCF7細(xì)胞 （1×T25培養(yǎng)瓶#密度75% 提供技術(shù)服務(wù)）
人乳腺癌細(xì)胞，BC009細(xì)胞 （1×T25培養(yǎng)瓶#密度75% 提供技術(shù)服務(wù)）
人乳腺癌細(xì)胞，BC－020細(xì)胞 （1×T25培養(yǎng)瓶#密度75% 提供技術(shù)服務(wù)）
人乳腺癌細(xì)胞，BC－021細(xì)胞 （1×T25培養(yǎng)瓶#密度75% 提供技術(shù)服務(wù)）
人乳腺癌細(xì)胞，BC－022細(xì)胞 （1×T25培養(yǎng)瓶#密度75% 提供技術(shù)服務(wù)）
人包皮成纖維細(xì)胞，HFF細(xì)胞 （1×T25培養(yǎng)瓶#密度75% 提供技術(shù)服務(wù)）
人羊膜細(xì)胞，WISH細(xì)胞 （1×T25培養(yǎng)瓶#密度75% 提供技術(shù)服務(wù)）
人羊膜細(xì)胞，HA細(xì)胞 （1×T25培養(yǎng)瓶#密度75% 提供技術(shù)服務(wù)）
人胚胎干細(xì)胞，E1C4細(xì)胞 （1×T25培養(yǎng)瓶#密度75% 提供技術(shù)服務(wù)）
人卵巢癌細(xì)胞，A2780細(xì)胞 （1×T25培養(yǎng)瓶#密度75% 提供技術(shù)服務(wù)）
人宮頸癌細(xì)胞，H1HeLa細(xì)胞 （1×T25培養(yǎng)瓶#密度75% 提供技術(shù)服務(wù)）
人卵巢癌細(xì)胞，Caov-3細(xì)胞 （1×T25培養(yǎng)瓶#密度75% 提供技術(shù)服務(wù)）
