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中級(jí)會(huì)員 | 第13年

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ATCC細(xì)胞
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胚胎成纖維細(xì)胞

LD50測(cè)定方法

時(shí)間:2015/8/17閱讀:3682
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正式試驗(yàn)
(1)取小鼠50只,體重20±2g,♀♂各半,隨機(jī)分為5組,10只/組。
(2)劑量 按等比級(jí)數(shù)增減,相鄰兩劑量比值1:0.6~0.9,設(shè)4~5個(gè)劑量組。
(3)給藥 普魯卡因溶液,ip。5個(gè)劑量組。
(4)統(tǒng)計(jì) 按改良寇氏法公式進(jìn)行計(jì)算。
LD50=lg-1[Xm-i(∑P-0.5)] (公式1)
Xm:zui大劑量組劑量對(duì)數(shù)值
i:相鄰兩組劑量高劑量與低劑量之比的對(duì)數(shù)(相鄰兩組對(duì)數(shù)劑量的差值)
P:各組動(dòng)物死亡率,用小數(shù)表示(如果死亡率為80%應(yīng)寫(xiě)成0.80)
∑P:各組動(dòng)物死亡率之總和
n:每組動(dòng)物數(shù)
Sx50= i×  (公式2)
Sx50:logLD50的標(biāo)準(zhǔn)誤
X50=logLD50
LD50的95%可信限=log-1(X50±1.96Sx50) (公式3)
LD50的平均可信限=LD50±(LD50的95%可信限的高限-低限)/2 (公式4)
【結(jié)果】 填入表11。
表11 各組小鼠用藥、死亡情況及有關(guān)計(jì)算

【目的】
掌握LD50測(cè)定方法及計(jì)算過(guò)程。
【原理】將一定濃度和一定體積的藥物,按一定比例灌胃給予小鼠,觀察7日,記錄不同劑量小鼠的死亡情況,計(jì)算半數(shù)致死量,以確定藥物急性毒性。
【器材】 鼠籠、燒杯、1ml注射器等。
【藥品】 普魯卡因溶液(5個(gè)劑量)
【動(dòng)物】 小鼠
【方法】
1.預(yù)試驗(yàn) 模實(shí)驗(yàn)劑量范圍,找出引起0~100%的估計(jì)致死量。
 
組別 動(dòng)物數(shù) 劑量 對(duì)數(shù)劑量 死亡率 P 2 其他數(shù)據(jù)
(n) (mg/kg) (X) (P)
【注意】
1、預(yù)試驗(yàn)要摸準(zhǔn)藥物引起0和100%死亡率劑量的所在范圍。
2、正式試驗(yàn)時(shí)各劑量按等比級(jí)數(shù)分組,應(yīng)避免zui大劑量組的死亡小于80%,zui小劑量組死亡率大于20%,否則改用其他方法計(jì)算。
3、室溫:20℃為宜。
4、認(rèn)真觀察中毒癥狀情況。
【思考題】
1、半數(shù)致死量(LD50)測(cè)定的目的意義如何?
2、半數(shù)致死量(LD50)常用的計(jì)算方法有哪些?

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