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閱讀:337發(fā)布時(shí)間:2014-3-27
碘[125I] 大鼠促黃體生成激素放免試劑盒說(shuō)明書(shū),現(xiàn)貨銷售
【藥品名稱】
通用名稱:碘[125I] 促黃體生成激素*
英文名稱:Iodine[125I]Luteiniziing Hormone Radioimmunoassay Kit
【成分】
規(guī)格 成分 | 100管 | 50管 | 制品狀態(tài) |
(1)LH標(biāo)準(zhǔn)品(S0~S6) | 7瓶(S0:5ml,其它各1ml) | 7瓶(S0:5ml,其它各1ml) | 液體 |
(2)125I-LH(紅色) | 1瓶 | 1瓶 | 凍干品 |
(3)兔抗-LH抗體(藍(lán)色) | 1瓶 | 1瓶 | 凍干品 |
(4)驢抗兔免疫分離劑 | 1瓶/50ml | 1瓶/25ml | 液 體 |
(5) LH質(zhì)控血清 | 2瓶 | 2瓶 | 凍干品 |
【促黃體生成激素放免試劑盒說(shuō)明書(shū),現(xiàn)貨銷售性狀】液體組分(免疫分離劑除外)應(yīng)澄清,無(wú)沉淀或絮狀物;凍干組分應(yīng)成疏松狀,復(fù)溶后應(yīng)無(wú)沉淀或絮狀物。
【放射性核素半衰期】本品所用核素為碘[125I],其物理半衰期(T½)為60天。
【臨床意義】
LH由垂體前葉嗜堿細(xì)胞分泌的一種糖蛋白激素,其蛋白部分由204個(gè)氨基酸構(gòu)成α和β兩個(gè)亞基,α亞基與FSH.TSH和HCG相同,只有β亞基具有特異的結(jié)構(gòu),兩者通過(guò)非共價(jià)鍵連接,分子量約為30KD。LH和FSH都呈現(xiàn)脈沖式分泌,故有較明顯的日內(nèi)和日間變異。女性月經(jīng)中期的LH高峰促成排卵;男性LH主要刺激睪丸間質(zhì)細(xì)胞分泌睪丸酮,又協(xié)同F(xiàn)SH促進(jìn)精子成熟。LH的測(cè)定在預(yù)測(cè)排卵,診斷不孕癥,研究和判斷下丘腦-垂體-性腺軸功能及相關(guān)內(nèi)分泌疾病的治療監(jiān)測(cè)等方面又重要意義。對(duì)作用于下丘腦-垂體-性腺軸的女性*的臨床藥理研究研究也有很大的價(jià)值。
本藥盒采用放射免疫分析方法,測(cè)定大鼠等動(dòng)物血清中的LH含量。
【測(cè)定原理】
采用競(jìng)爭(zhēng)機(jī)制原理,標(biāo)準(zhǔn)或樣品中的LH和加入的125I-LH共同與一定量的特異性抗體產(chǎn)生競(jìng)爭(zhēng)性免疫反應(yīng)。125I-LH與抗體的結(jié)合量與標(biāo)準(zhǔn)或樣品中LH的含量呈一定的函數(shù)關(guān)系。用免疫分離劑(PR)將結(jié)合部分(B)與游離部分(F)分離后,測(cè)定結(jié)合部分的放射性強(qiáng)度,并計(jì)算相應(yīng)結(jié)合率B/B0。用已知標(biāo)準(zhǔn)LH含量與對(duì)應(yīng)結(jié)合率作圖,即得標(biāo)準(zhǔn)抑制曲線。從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查知對(duì)應(yīng)結(jié)合率的待測(cè)樣品中LH的含量。
【適用儀器】適用于各類γ-*。
【樣本要求】
取靜脈血分離血清,待測(cè);血漿則需加入抗凝劑,混勻,分離血漿后,待測(cè);如不立即測(cè)量,可將樣品密封后,置于-20℃儲(chǔ)存?zhèn)錅y(cè),保存期不超過(guò)一個(gè)月;若分離血清后5小時(shí)內(nèi)測(cè)量,可將樣品2~8℃保存。冰凍樣品在保存過(guò)程中應(yīng)避免反復(fù)凍融。冰凍樣品測(cè)定前,將樣品置于室溫或常溫水中融化,并充分搖勻。
【用法用量】
1 試劑配制、使用方法和保存
(1)LH標(biāo)準(zhǔn)品:液體,直接使用。濃度分別為0,5,10,25,50,100,200mIU/ml。2~8℃保存可穩(wěn)定42天,未開(kāi)封標(biāo)準(zhǔn)品2-8℃保存標(biāo)識(shí)的有效期內(nèi)穩(wěn)定。促黃體生成激素放免試劑盒說(shuō)明書(shū),現(xiàn)貨銷售
(2)125I-LH:凍干品,100管用10ml蒸餾水溶解,50管用5ml蒸餾水溶解。若一次加樣超過(guò)100管,兩瓶混合后使用;50管標(biāo)記物放射性不大于111 KBq(3μCi)。2-8℃保存標(biāo)識(shí)的有效期內(nèi)穩(wěn)定。
(3)兔抗-LH抗體:凍干品,用蒸餾水溶解,溶解方法見(jiàn)封底。同次實(shí)驗(yàn)抗體加樣超過(guò)100管時(shí),兩瓶溶解后混合使用??贵w溶解后2~8℃保存可穩(wěn)定42天,凍干品-20℃保存有效期內(nèi)穩(wěn)定。
(4)驢抗兔免疫分離劑:液體,直接使用。加樣前必須搖勻!2~8℃保存,有效期內(nèi)穩(wěn)定。開(kāi)封后42天內(nèi)穩(wěn)定。若加樣超過(guò)100管,兩瓶混合后搖勻。
(5)LH質(zhì)控血清:使用方法、保存條件、有效期及附值詳見(jiàn)質(zhì)控血清使用說(shuō)明書(shū)。
2 測(cè)定步驟
取圓底聚苯乙烯試管若干,用記號(hào)筆或特殊鉛筆編號(hào)NSB、S0~S6和待測(cè)樣品管等,然后用微量加樣器按下表加樣。加樣前所有試劑(尤其分離劑?。┌ù郎y(cè)樣品要搖勻,并且平衡到室溫。
加樣程序表 單位:μl
管別 試劑 | 總T管 | NSB管 | S0~S6管 | 質(zhì)控或待 |
LH標(biāo)準(zhǔn)品 | — | 300(S0) | 200 | — |
質(zhì)控或待測(cè)樣品 | — | — | — | 200 |
125I-LH | 100 | 100 | 100 | 100 |
兔抗-LH抗體 | — | — | 100 | 100 |
混勻,4℃溫育16~24小時(shí) | ||||
驢抗兔免疫分離劑 | — | 500 | 500 | 500 |
充分搖勻,室溫放置15分鐘,3500轉(zhuǎn)/分鐘離心15分鐘,吸棄上清,測(cè)各沉淀管的放射性計(jì)數(shù)(cpm)。 |
3 數(shù)據(jù)處理
(1) 聯(lián)機(jī)處理:由電腦自動(dòng)處理得出結(jié)果。注意放射免疫方法和免疫放射方法由于原理不同,處理軟件也不一樣,用戶一定要使用適合的處理軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。在此建議用戶使用log-logit或四參數(shù)數(shù)據(jù)處理模式。
(2) 手工作圖或計(jì)算器處理:
1). 百分結(jié)合率計(jì)算:設(shè)S0管計(jì)數(shù)為B0,各標(biāo)準(zhǔn)管或樣品管計(jì)數(shù)為B,非特異管計(jì)數(shù)為NSB,則百分結(jié)合率計(jì)算公式為:B/ B0=(B-NSB)/( B0-NSB)×100%
2). logit計(jì)算:各標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)或樣品管的logit值計(jì)算公式為:logit=ln[(B/ B0)/(1-B/ B0)]
3). 手工作圖:以標(biāo)準(zhǔn)濃度取log值為橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)的logit值為縱坐標(biāo)在普通坐標(biāo)紙上或以標(biāo)準(zhǔn)濃度為橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)的B/B0為縱坐標(biāo)在log-logit坐標(biāo)紙上畫(huà)出標(biāo)準(zhǔn)曲線(理想化時(shí)是一條直線)。根據(jù)待測(cè)樣品的B/B0可以從坐標(biāo)紙上查出樣品的濃度值。注意:如果使用普通坐標(biāo)紙,查出的數(shù)值應(yīng)取反對(duì)數(shù)才是zui后的濃度值。
4). 計(jì)算器處理:使用有線性擬合功能的計(jì)算器,可以比較方便地計(jì)算出樣品濃度值,具體操作方法請(qǐng)查閱計(jì)算器的使用說(shuō)明書(shū)。
標(biāo)準(zhǔn)曲線舉例(僅供參考,不得用于實(shí)際計(jì)算)。 濃度單位:mIU/ml
項(xiàng)目 | NSB | 0 | 5 | 10 | 25 | 50 | 100 | 200 |
百分結(jié)合率(%) | B/T | B/B0 | ||||||
2.2 | 40 | 85 | 76 | 59 | 34 | 26 | 11 | |
log-logit 主要曲線參數(shù) | A=3.48 B=-2.34 R=-0.995 ED75=10.3 ED50=30.0 ED25=87.7 |
【參考正常值】
血清參考正常值:
雄性:5-30mIU/ml
雌性:6-217mIU/ml
濾泡期:2-30mIU/ml
黃體期:0-20mIU/ml
排卵高峰:40-200 mIU/ml
由于地區(qū)及使用儀器不同,所測(cè)的正常值會(huì)存在一定的差異,所以本說(shuō)明書(shū)提供的正常值僅作參考,各實(shí)驗(yàn)室能建立符合本實(shí)驗(yàn)室要求的正常值范圍。
【產(chǎn)品性能指標(biāo)】
【禁忌】本品僅供體外科研試驗(yàn)用!
【注意事項(xiàng)】
【貯藏】2~8℃保存。
【有效期】1個(gè)月。
附:抗體溶解方法:
兔抗-LH抗體,用蒸餾水溶解,100管產(chǎn)品每瓶抗體加()ml,50管產(chǎn)品抗體每瓶加()ml(如不填寫(xiě),50管藥盒用5ml溶解,100管藥盒用10ml溶解,若為液體抗體請(qǐng)直接使用)。
商鋪:http://www.duty-free.cn/st132832/
主營(yíng)產(chǎn)品:流式標(biāo)記抗體,F(xiàn)ITC,PE,CY3,5,7標(biāo)記ELISA試劑盒、生化檢測(cè)試劑盒、金標(biāo)檢測(cè)試劑盒、分子生物學(xué)試劑盒、進(jìn)口國(guó)產(chǎn)胎牛血清、生物抗體、細(xì)胞,試劑耗材
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