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C肽*說明書

閱讀：593發(fā)布時間：2013-06-21

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碘[¹²⁵I]C肽*說明書

【藥品名稱】

通用名稱：碘[¹²⁵I]C肽*

英文名稱：Iodine[¹²⁵I]C-peptide Radioimmunoassay Kit

漢語拼音：Dian [¹²⁵I] C-tai Fangshemianyifenxi Yaohe

【成分】

規(guī)格成分	100管	50管	制品狀態(tài)
C-P標(biāo)準(zhǔn)品（A～F）	6瓶	6瓶	凍干品
¹²⁵I-C-P（紅色）	2瓶	1瓶	凍干品
C-P緩沖液	1瓶/40ml	1瓶/40ml	液體
兔抗-C-P抗體（藍(lán)色）	1瓶	1瓶	凍干品
驢抗兔免疫分離劑	1瓶/50ml	1瓶/25ml	液體
C-P質(zhì)控血清	1套	1套	凍干品

【性狀】液體組分（免疫分離劑除外）應(yīng)澄清，無沉淀或絮狀物；凍干組分應(yīng)成疏松狀，復(fù)溶后應(yīng)無沉淀或絮狀物。

【放射性核素半衰期】本品所用核素為碘[125I]，其物理半衰期（T½）為60天。

【臨床意義】

C肽（C-Peptide,C-P）是由31個氨基酸組成的直鏈多肽，分子量3021。由胰島素原在轉(zhuǎn)化酶的作用下，生成等克分子的C-肽和胰島素。由于C肽和胰島素以等摩爾的比例從胰島素細(xì)胞釋放至血液，因此測定血清C-肽可以反映胰島β細(xì)胞功能；此外，由于胰島素抗體和C-肽沒有交叉反映，而藥用胰島素中不含C肽，所以外源性胰島素不影響C肽的放免測定。因此，測定血清C肽對于接受胰島素治療的物種更能地判斷β細(xì)胞的分泌功能。而且對于糖尿病的分型，治療和預(yù)后估計以及對于糖代謝有關(guān)疾病的研究具有十分重要的意義。

本藥盒主要用于測定血清C-P含量。

【測定原理】

本方法采用競爭放射免疫分析法，即標(biāo)準(zhǔn)或待測樣品中的C-P和¹²⁵I-C-P共同與*的特異性C-P抗體在適宜的條件下進(jìn)行競爭性結(jié)合反應(yīng)。一部分¹²⁵I-C-P與抗體結(jié)合形成復(fù)合物，而另一部分呈游離狀態(tài)。¹²⁵I-C-P與抗體結(jié)合的比例取決于標(biāo)準(zhǔn)或待測樣品中非標(biāo)記C-P的含量，非標(biāo)記C-P的含量越高，¹²⁵I-C-P與抗體形成復(fù)合物越少，非標(biāo)記C-P的含量越低，¹²⁵I-C-P與抗體形成復(fù)合物越多。抗原-抗體復(fù)合物用免疫分離劑沉淀下來，測定沉淀物的放射性計數(shù)。經(jīng)過適當(dāng)?shù)臄?shù)據(jù)處理后可獲得標(biāo)準(zhǔn)曲線，從標(biāo)準(zhǔn)上查出被測樣品的C-P含量（數(shù)據(jù)可由計算機自動處理）。

【適用儀器】適用于各類γ-*。

【樣本要求】

取靜脈血分離血清，待測；如不立即測量，可將樣品密封后，置于-20℃儲存?zhèn)錅y，-20℃保存不超過一個月。冰凍樣品在保存過程中應(yīng)避免反復(fù)凍融。冰凍樣品測定前，講樣品置于室溫或常溫水中融化，并充分搖勻。

【用法用量】

1 試劑配制、使用方法和保存

（1）C-P標(biāo)準(zhǔn)品：凍干品，向每瓶標(biāo)準(zhǔn)品中準(zhǔn)確地加入1ml緩沖液溶解。溶解后搖勻方可適用。溶解后各標(biāo)準(zhǔn)濃度值分別為0.25,0.5,1.0,3.0,6.0,12.0ng/ml。標(biāo)準(zhǔn)復(fù)溶后在-20℃保存可穩(wěn)定42天，凍干品-20℃保存有效期內(nèi)穩(wěn)定。

（2）¹²⁵I-C-P：凍干品，用緩沖液溶解，每瓶加5ml，加樣前搖勻。每瓶標(biāo)記物放射性不大于74KBq（2μCi），沒用完的標(biāo)記物-20℃保存可穩(wěn)定42天。

（3）兔抗-C-P抗體：凍干品，用緩沖液溶解，每瓶抗體加＿ml（如不填寫100T加10ml,50T加5ml緩沖液溶解）?？贵w溶解后2～8℃保存可穩(wěn)定42天，凍干品-20℃保存有效期內(nèi)穩(wěn)定。

（4）驢抗兔免疫分離試劑：液體，加樣前必須搖勻！2～8℃保存，有效期內(nèi)穩(wěn)定。開封后45天內(nèi)穩(wěn)定。

（5）C-P緩沖液：液體，2～8℃保存，有效期內(nèi)穩(wěn)定。

（6）C-P質(zhì)控血清：凍干品，使用前向每瓶質(zhì)控血清中準(zhǔn)確加入0.5ml蒸餾水溶解。復(fù)溶后-20℃保存可穩(wěn)定42天，凍干品-20℃保存有效期內(nèi)穩(wěn)定。有效期及附值，詳見質(zhì)控血清適用說明書。

2 測定步驟

取圓底聚苯乙烯試管若干，用記號筆或特殊鉛筆編號NSB、S₀～S₆和待測樣品管等，然后用微量加樣器按下表加樣。加樣前所有試劑（尤其分離劑?。┌ù郎y樣品要搖勻，并且平衡到室溫。

加樣程序表單位：μl

管別試劑	總T	NSB	S₀	S₁～S₅	待測樣品
C-P緩沖液	—	200	100	—	—
C-P標(biāo)準(zhǔn)品（A～F）	—	—	—	100	—
質(zhì)控或待測樣品	—	—	—	—	100
兔抗-C-P 抗體	—	—	100	100	100
¹²⁵I-C-P	100	100	100	100	100
混勻，2～8℃溫育20～24小時。
驢抗兔免疫分離劑	—	500	500	500	500
充分搖勻，室溫放置15分鐘，3500轉(zhuǎn)/分鐘離心15分鐘，吸棄上清，測各沉淀管的放射性計數(shù)（cpm）。

3 數(shù)據(jù)處理

（1）聯(lián)機處理：由電腦自動處理得出結(jié)果。注意放射免疫方法和免疫放射方法由于原理不同，處理軟件也不一樣，用戶一定要使用適合的處理軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。在此建議用戶使用logit-log或四參數(shù)數(shù)據(jù)處理模式。

（2）手工作圖或計算器處理：

1）. 百分結(jié)合率計算：設(shè)S₀管計數(shù)為B₀，各標(biāo)準(zhǔn)管或樣品管計數(shù)為B，非特異管計數(shù)為NSB，則百分結(jié)合率計算公式為：B/ B₀=（B－NSB）/（ B₀－NSB）×100%

2）. logit計算:各標(biāo)準(zhǔn)點或樣品管的logit值計算公式為： logit=ln（B/ B₀）/（1－B/ B₀）

3）. 手工作圖：以標(biāo)準(zhǔn)濃度取log值為橫坐標(biāo)，對應(yīng)的logit值為縱坐標(biāo)在普通坐標(biāo)紙上或以標(biāo)準(zhǔn)濃度為橫坐標(biāo)，對應(yīng)的B/B₀為縱坐標(biāo)在logit-log坐標(biāo)紙上畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線（理想化時是一條直線）。根據(jù)待測樣品的B/B₀可以從坐標(biāo)紙上查出樣品的濃度值。注意：如果使用普通坐標(biāo)紙，查出的數(shù)值應(yīng)取反對數(shù)才是zui后的濃度值。

4）. 計算器處理：使用有線性擬合功能的計算器，可以比較方便地計算出樣品濃度值，具體操作方法請查閱計算器的使用說明書。

標(biāo)準(zhǔn)曲線舉例（僅供參考，不得用于實際計算）。

項目	NSB	0	A	B	C	D	E	F
濃度值（ng/ml）		0	0.25	0.5	1	3	6	12
百分結(jié)合率（%）	B/T	B/B₀
百分結(jié)合率（%）	1.5	40	87	70	57	29	19	10
logit-log 主要曲線參數(shù)	A=0.27 B=-2.16 R=-0.9995 ED75=0.41 ED50=1.33 ED25=4.29

【參考正常值】

空腹血清C-P參考正常值：平均值1.6ng/ml，范圍0.6～3.4 ng/ml。

餐后血清C-P峰值約為空腹時的5倍，峰值一般出現(xiàn)在餐后30～60分鐘（與進(jìn)食食品種類有一定關(guān)系），3小時后接近空腹值。

單位換算：1ng/ml=100ng/dl=1000ng/l=1μg/l=0.331nmol/l

由于地區(qū)及使用儀器不同，所測的正常值會存在一定的差異，所以本說明書提供的正常值僅作參考，各實驗室能建立符合本實驗室要求的正常值范圍。

【產(chǎn)品性能指標(biāo)】

1. 測定范圍：0.25～12ng/ml

2. 靈敏度：0.1 ng/ml

3. 精密度：批內(nèi)變異系數(shù)（CV）<10%；批間變異系數(shù)（CV）<15%。

4. 使用期限：見產(chǎn)品外包裝。

【禁忌】本品僅供體外診斷用！

【注意事項】

1. 收到試劑盒后，盡快存放在2～8℃。

2. 使用前請詳細(xì)閱讀此說明書。

3. 由于標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)記物溶解后易失活，溶解后應(yīng)及時保存在-20℃條件下，必要時分成若干份-20℃保存。

4. 不同藥盒或不同月份的同種藥盒的組分不得混用。

5. 吸棄上清液時，注意不得損失沉淀物，否則將明顯影響測定結(jié)果。

6. 當(dāng)樣品中C-P濃度高于F點濃度時，可將樣品用緩沖液稀釋5-10倍后復(fù)測，測定濃度乘以稀釋倍數(shù)即為樣品的濃度。

7. 藥盒請在有效期內(nèi)使用。

8. 臨床標(biāo)本均應(yīng)視為有潛在傳染性，請按傳染病實驗室規(guī)程操作。

9. 使用本藥盒應(yīng)注意放射防護(hù)，放射性廢棄物須按放射防護(hù)條例規(guī)定處理。

10.使用本品的操作人員應(yīng)經(jīng)過專業(yè)技術(shù)培訓(xùn)。

【孕婦及哺乳期婦女用藥】由于本品僅供體外診斷用，兒童不需接觸本品，所以對其健康無損害。

【貯藏】2～8℃保存，其中¹²⁵I-C-P及C-P標(biāo)準(zhǔn)品溶解后-20℃保存。

【有效期】1個月。

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