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上海信然實(shí)業(yè)有限公司
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更新時(shí)間:2017-03-14 15:31:59瀏覽次數(shù):459次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 智慧城市網(wǎng)人結(jié)腸癌細(xì)胞,HT-29細(xì)胞,全國(guó)大學(xué)生物實(shí)驗(yàn)室、科研單位,陸陸續(xù)續(xù)在預(yù)訂,公司擁有多國(guó)細(xì)胞資源,代理品牌細(xì)胞產(chǎn)品,專業(yè)培養(yǎng)細(xì)胞很多年。
人結(jié)腸癌細(xì)胞,HT-29細(xì)胞 HT-29 貼壁上皮細(xì)胞
(1)細(xì)胞背景
該細(xì)胞是1964年由Fogh J用移植培養(yǎng)方法和含15%FBS的F12培養(yǎng)液從原發(fā)性腫瘤分離的。近來(lái),已建株的培養(yǎng)細(xì)胞用含血清的McCoy’s 5a培養(yǎng)基培養(yǎng)。 該細(xì)胞系在裸鼠中成瘤,也能在類固醇處理的地鼠中成瘤。該細(xì)胞可合成IgA、CEA、TGFβ結(jié)合蛋白和黏液素;表達(dá)*受體,但沒有檢測(cè)到血漿酶原活性;不表達(dá)CD4,但細(xì)胞表面表達(dá)半乳糖神經(jīng)酰胺(HIV的可能替代受體)。該細(xì)胞系癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、Myb、sis、fos陽(yáng)性;p53基因過表達(dá),并且在273位密碼子處發(fā)生G→A突變,導(dǎo)致Arg→His替換。
(2)客戶自備試劑
1)PBS
2)DMEM(高糖)培養(yǎng)基+ 10%胎牛血清+ 1%雙抗
3)0.25% (W/V)*(含0.02% EDTA)
(3)細(xì)胞背景
1)生長(zhǎng)方式:貼壁
2)種屬:Homo sapiens 人
(4)人結(jié)腸癌細(xì)胞,HT-29細(xì)胞培養(yǎng)條件
1)培養(yǎng)基:DMEM(高糖)培養(yǎng)基+ 10%胎牛血清+ 1%雙抗
2)溫度:37.0°C
3)氣體:空氣 95%,CO2 5%
(5)培養(yǎng)方法
收到細(xì)胞后,在倒置顯微鏡下觀察整個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)情況:
如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿,用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi),嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,留10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿(達(dá)80-90%)。即可進(jìn)行傳代,具體步驟如下:
1)棄去培養(yǎng)液,用PBS洗1-2次。
2)向瓶?jī)?nèi)加入1.0-2.0ml*液,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓,迅速拿回操作臺(tái),吸取*,加含有6ml 含10%血清的培養(yǎng)液,輕輕吹打細(xì)胞。
3)加入等量的的培養(yǎng)液,輕輕吹打混勻后吸出一半,分到新的培養(yǎng)
4)傳代比例:1:2-1:3
(6)常見問題及解決方案
1)培養(yǎng)瓶有破裂,培養(yǎng)液有漏液:細(xì)胞*可能會(huì)污染,所以我們會(huì)及時(shí)安排幫老師解決。
2)細(xì)胞漂浮:培養(yǎng)瓶不開封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察,如細(xì)胞大部分又貼回瓶底,表明細(xì)胞活力正常,剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉,留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,細(xì)胞生長(zhǎng)至匯合度80%,進(jìn)行消化傳代;如細(xì)胞還是不貼壁,將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術(shù)人員會(huì)一直跟蹤指導(dǎo),直到問題解決。
公司更多細(xì)胞產(chǎn)品體現(xiàn)!
春天來(lái)了,花兒開了、草兒綠了,到處都是一片生機(jī)盎然的景象,作為科研單位的人員又該忙碌起來(lái)了,可能要面對(duì)很多科研項(xiàng)目,做相關(guān)的研究,公司特在這個(gè)時(shí)期,舉行細(xì)胞開學(xué)季優(yōu)惠活動(dòng),買免費(fèi)送培養(yǎng)基、培養(yǎng)液,并有親情手機(jī)費(fèi)送(50元、100元、200元、500元不等),訂兩株細(xì)胞以上的科研工作者,并有機(jī)會(huì)獲得公司的科研經(jīng)費(fèi)(一等獎(jiǎng):8000元,二等獎(jiǎng):5000元,三等獎(jiǎng):3000元)
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