兔抗人血清抗體的制備和效價測定的實驗原理
凡能刺激機體產(chǎn)生抗體，并能與抗體發(fā)生特異性結合的物質(zhì)稱為抗原。物質(zhì)所具有的這種特性稱為抗原性（Antigenicity）。當機體受抗原刺激后，在體液中出現(xiàn)的一種能與相應抗原發(fā)生反應的球蛋白，稱免疫球蛋白（Immunoglobulin, Ig）。含有免疫球蛋白的血清稱免疫血清。
醫(yī)學上常見的抗原物質(zhì)，種類很多，如病原微生物及其代謝產(chǎn)物（毒素），異種動物血清（各種抗毒素，免疫血清的來源），同種血型抗原，同種異體皮膚，器官等組織抗原，自身組織抗原，腫瘤細胞抗原。具有抗原性的各種化學成分有蛋白質(zhì)、脂蛋白、多糖體、脂多糖、糖蛋白、多肽以及核蛋白等，這些抗原物質(zhì)均可刺激機體產(chǎn)生抗體或細胞免疫反應。
機體在抗原物質(zhì)的刺激下產(chǎn)生特異性免疫反應的過程，大體上可分為3個階段。
1．致敏階段（加工處理抗原階段）：當顆粒性抗原初次進入人體內(nèi)時，首先被巨噬細胞吞噬（可溶性抗原可直接被T淋巴細胞吞飲，多糖與鞭毛抗原物質(zhì)可直接作用于B淋巴細胞）。通過巨噬細胞漿內(nèi)溶酶體酶的作用，把抗原物質(zhì)消化降解，而保留其抗原決定簇（特異性抗原成分）。經(jīng)過加工處理的抗原分子結構比原來的小，抗原性卻比原來的加強。當處理過的抗原與巨噬細胞的RNA結合成為抗原-RNA復合物（抗原信息），就具有強烈吸引免疫活性細胞的作用，能把抗原-RNA復合物傳遞給免疫活性細胞（Immunologically competent cell）,啟動免疫反應。
2．反應階段（淋巴細胞分化增殖階段）：免疫活性細胞在受到抗原信息的刺激后，發(fā)生母細胞化，進而大量增殖。由于抗原的性質(zhì)不同，刺激T細胞分化成致敏淋巴細胞。抗原信息刺激B細胞使分化成漿細胞。在分化過程中小部成為“記憶”細胞。由于“記憶”細胞的存在，即使抗原在漿內(nèi)消失很久（數(shù)月至數(shù)年或更長）以后，仍能與再度進入體內(nèi)的相應抗原迅速引起較強的免疫反應（回憶反應）。
3．效應階段（發(fā)生免疫反應階段）：當致敏淋巴細胞再次遇到相應抗原的刺激后，能釋放出多種具有生物活性的物質(zhì)（淋巴因子），參與細胞免疫反應；漿細胞可形成各種類型的免疫球蛋白（抗體），參與體液免疫反應。
在免疫期間，不僅各個不同的動物，而且同一動物在不同的時間內(nèi)抗血清效價、特異性、親合力等都可能發(fā)生變化，因而必須經(jīng)常地采血測試。只有在對抗血清的效價、特異性、親合力等方面作*的評價后，才可使用所取得的抗血清。
兔抗人血清的效價，就是指血清中所含抗體的濃度或含量。效價測定的方法常用的是放射免疫法，此法對所有的抗體均適用。某些由大分子（如蛋白類）抗原所產(chǎn)生的抗體，可用雙擴散等方法測定。本實驗采用雙向免疫擴散法測定效價。
