一、材料、試劑和儀器

1 材料 植物根或葉
2 試劑
1） Trizol試劑（含酚、異硫氰酸胍和溶解劑等）
2）75%乙醇：用DEPC處理水配制75%乙醇，（用高溫滅菌器皿配制），然后裝入高溫烘烤的玻璃瓶中，存放于低溫冰箱。
3 儀器 水浴鍋，低溫高速離心機(jī)

二、實(shí)驗(yàn)程序

1 將組織在液氮中磨成粉末后，再以50-100 mg組織加入1mL Trizol液，注意樣品總體積不能超過(guò)所用Trizol體積的10% 。
2 研磨液室溫放置5min，然后以每1mL Trizol液加入0.2 mL的比例加入氯仿，蓋緊離心管，用手劇烈搖蕩離心管15sec。
3 12000g 離心10min，取上層水相于一新的離心管，按每mL Trizol液加0.5 mL異丙醇的比例加入異丙醇，室溫放置10min，12000g 離心10min。
4 棄去上清液，按每mL Trizol液加入至少1mL的比例加入75%乙醇，渦旋混勻，4℃下7500g離心5min。
5 小心棄去上清液，然后室溫或真空干燥5-10min，注意不要干燥過(guò)分，否則會(huì)降低RNA的溶解度。然后將RNA溶于水中，必要時(shí)可55℃-60℃助溶 10min。RNA可進(jìn)行mRNA分離，或貯存于70%乙醇中于-70℃保存。