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一、實驗目的1.了解簡單染色法的原理,并掌握其操作方法。2.學習并掌握微生物涂片、染色的基本技術(shù)和無菌操作技術(shù)。3.鞏固顯微鏡(油鏡)的使用方法。4.初步認識細菌的形態(tài)特征。 二、實驗原理 細菌個體微小,且較透明,必須借助染色法使菌體著色,與背景形成鮮明的對比,以便在顯微鏡下進行觀察。根據(jù)實驗目的不同,可分為簡單染色法、鑒別染色法和特殊染色法等。簡單染色法是zui基本的染色方法,是利用單一染料對細菌進行染色。此法操作簡便,適用于菌體一般形狀和細菌排列的觀察。常用堿性染料進行簡單染色。 三、試劑與器材1.材料 大腸桿菌,枯草芽孢桿菌2.試劑 呂氏堿性美藍染液(或草酸銨結(jié)晶紫染液)、齊氏石炭酸復紅染液。3.器材 顯微鏡、酒精燈、載玻片、接種環(huán)、雙層瓶(內(nèi)裝香柏油和二甲苯)等。 四、實驗內(nèi)容簡單染色法:涂片→干燥→固定→染色→水洗→干燥→鏡檢 五、關(guān)鍵步驟及注意事項1.涂片時,生理鹽水及取菌不宜過多,涂片應盡可能均勻,2.水洗步驟水流不宜過大,過急,以免涂片薄膜脫落。
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