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血涂片的顯微檢查是血液細(xì)胞學(xué)檢查的基本方法,臨床上應(yīng)用極為廣泛,制備厚薄適宜,分布均勻,染色良好的血涂片是血液學(xué)檢查的重要基本技術(shù)之一。
涂片法制片是生物顯微制片的基本方法之一。
人血涂片的制作
步驟:
可分5個步驟進(jìn)行
消毒→取血→推片→染色→觀察
消毒與取血
消毒
先按取血部位,使血流通暢;再用酒精消毒采血針和取血部位(如指尖)。
取血
待酒精干后,刺破皮膚,使血自然流出,勿擠。取干凈載片,讓血滴在離載片一端中4~5毫米處,注意手指人血涂片的制作持握載片的邊緣,勿觸及其表面。不能使載片接觸取血部位的皮膚。
推片
取一塊邊緣光滑的載片做推片。將其一端置于血滴前方,向后移動到接觸血滴,使血液均勻分散在推片與載片的接觸處。然后使推片與載片呈30°~40°角,向另一端平穩(wěn)地推出,如右圖所示。涂片推好后,迅速在空氣中搖,使之自然干燥。
染色
用特種玻璃鉛筆在血膜兩側(cè)畫兩條線,防止染液外溢。再將瑞氏染液(伊紅-亞甲基藍(lán))滴在血膜上,至染液淹沒全部血膜,染半分鐘。加等量蒸餾水(或緩沖液)與染液混合再染5分鐘。zui后用蒸餾水把染液沖掉,用吸水紙吸干,自然干燥后,即可觀察。
觀察
紅細(xì)胞
淡紅色,無核的圓形細(xì)胞,因紅細(xì)胞為雙凹形,故邊緣部分染色較深,中心較淺,直徑7-8微米。
顆粒白細(xì)胞
嗜中性顆粒白細(xì)胞:體積略大于紅細(xì)胞,細(xì)胞核被染成紫色分葉狀,可分1-5葉。直徑10-12微米。
嗜酸性顆粒白細(xì)胞:略大于嗜中性白細(xì)胞,細(xì)胞核染成紫色,通常為2葉,胞質(zhì)充滿嗜酸性大圓顆粒,被染成鮮紅色。直徑10-15微米。
嗜堿性顆粒白細(xì)胞:體積略小于嗜酸性白細(xì)胞,細(xì)胞質(zhì)中有大小不等被染成紫色的顆粒,顆粒數(shù)目較嗜酸性白細(xì)胞的顆粒少,核1-2葉,染成淡藍(lán)色。直徑10-11微米。
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