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當(dāng)前位置:上海晶抗生物工程有限公司>>技術(shù)文章>>今日說明:試驗(yàn)時怎樣挑選到適合自己試驗(yàn)的抗體呢?
抗體關(guān)于特異性的挑選:特異性的挑選首要需求考慮四個方面:蛋白特異性、種屬特異性、試驗(yàn)辦法特異性、符號物的特異性。
1、蛋白特異性:針對需求檢測的蛋白查找抗體,幾個細(xì)節(jié)要差異,重組表達(dá)的蛋白和內(nèi)源性蛋白的檢測,對抗體的要求是不相同的,留心查看抗體說明書的檢測說明。假定重組蛋白不是全長表達(dá),則需求留心抗體的免疫原區(qū)域是否在重組蛋白區(qū)域內(nèi)。
2、種屬特異性:同種蛋白不同物種,有著或大或小的差異?,F(xiàn)在大部分商品化抗體都是以人源蛋白序列為模板重組蛋白或規(guī)劃多肽抗原的,依據(jù)蛋白的同源性的情況與其他種屬發(fā)作穿插反應(yīng)。需求參照說明書注明的可反應(yīng)種屬信息。一些稀有種屬很難找到抗體,可以經(jīng)過蛋白的序列比對,挑選同源序列免疫的抗體。
3、試驗(yàn)辦法特異性:現(xiàn)在運(yùn)用抗體的試驗(yàn)辦法有許多,不同的運(yùn)用辦法過程中,由于對蛋白樣品的處理辦法不相同,蛋白的含量有差異,對抗體的辨認(rèn)表位和效價要求都是不相同的。詳細(xì)的依據(jù)說明書注明的產(chǎn)品應(yīng)用辦法進(jìn)行挑選。
4、符號物的特異性一般依據(jù)試驗(yàn)操作的試驗(yàn)辦法不會運(yùn)用帶有符號的一抗,比方WB、IHC等,都是經(jīng)過二抗類的試劑符號抵達(dá)作用呈現(xiàn)的目的。但是依據(jù)儀器分析的一些試驗(yàn),或許就會運(yùn)用到直接符號的一抗,比方流式試驗(yàn)。那么需求了解到自己行將運(yùn)用的儀器能檢測到的熒光規(guī)模,不通的參數(shù)要求挑選對應(yīng)的符號物。在免疫熒光雙標(biāo)試驗(yàn)中,需求選配不同的熒光物。
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