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豚鼠elisa試劑盒的因素和抗原

閱讀：263發(fā)布時間：2015-4-8

豚鼠elisa試劑盒特異性因素： 固相載體的選擇。ELISA中常用的固相載體有微量滴定板、小珠和小試管三種，以微量滴定板zui為常見。包被物的純度。在酶聯(lián)免疫測定尤其是間接ELISA中，試劑的特異性取決于使用抗原的純度。包被抗體的效價。具有高親和力和高特異性的包被抗體，是決定試劑特異性的重要方面。封閉。是ELISA中重要的一步，目的是封閉固相載體表面尚未被所占據(jù)的空隙，減少后續(xù)步驟中非特異性蛋白的干擾。
豚鼠elisa試劑盒雙抗體夾心法是檢測抗原zui常用的方法：
但要注意的是在一步法（待測抗原與酶標(biāo)抗體一起加入反應(yīng)）測定中，當(dāng)標(biāo)本中受檢抗原的含量很高時，過量抗原分別和固相抗體及酶標(biāo)抗體結(jié)合，而不再形成“夾心復(fù)合物"出現(xiàn)鉤狀效應(yīng)，甚至可不顯色而出現(xiàn)假陰性結(jié)果。因此在使用一步法試劑測定標(biāo)本中含量可異常增高的物質(zhì)（例如血清中HBsAg、AFP和尿液hCG等）時，應(yīng)注意可測范圍的zui高值。用高親和力的單克隆抗體制備此類試劑可削弱鉤狀效應(yīng)。 雙抗體夾心法測抗原的另一注意點是類風(fēng)濕因子（RF）的干擾。RF是一種自身抗體，多為IgM型，能和多種動物IgG的Fc段結(jié)合。用作雙抗體夾心法檢測的血清標(biāo)本中如含有RF，它可充當(dāng)抗原成份，同時與固相抗體和酶標(biāo)抗體結(jié)合，表現(xiàn)出假陽性反應(yīng)。雙抗體夾心法適用于測定二價或二價以上的大分子抗原，但不適用于測定半抗原及小分子單價抗原，因其不能形成兩位點夾心。


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