小鼠ELISA試劑盒試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在科研上得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
下面將小鼠ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題解決辦法總結(jié)于下：
1、選擇試劑：
選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2、標本收集與保存：
避免使用肉眼可見的溶血標本、高脂標本和混濁標本；2-8℃下，標本可放置24-48小時，*保存需放置-20℃下。
3、請避免反復(fù)凍融。
4、檢測試劑要適量：
另一點也很顯而易見：切勿使用過多的檢測試劑。如果濃度過高，或者未正確稀釋，則會導(dǎo)致高背景。也不要顯色過度，如有必要，優(yōu)化一下何時應(yīng)加入終止液。
5、抗體濃度須優(yōu)化：
通常我們會仿照“實驗前輩”留下來的操作步驟進行試驗，但是如果試劑稍有不同，則可能需要優(yōu)化抗體的量。記住，非特異的抗體結(jié)合會增加背景。為了防止這一點，切勿使用過多的一抗或二抗。
6、不會正確使用加樣器：
加 樣：室溫溫育的試劑，特別是溫育時間比較短的實驗操作的試劑，加樣對數(shù)據(jù)的影響比較大，特別要注意加樣問題。
7、洗滌液：
用前配制；有的試劑盒會標明，配好的4度下一般可以放一個月；如果沒有標明，盡量用新鮮的，不要多配制。 顯色液（有A液和B液的），用前15分鐘配制；
8、標準品：
有的試劑盒中標準品是已經(jīng)配制好的，4度保存；有的是要現(xiàn)配制的；按照說明書操作；
濃縮*結(jié)合的二抗和HRP：如果需要配制，試劑盒沒注明配好可以保存多久的話，盡量現(xiàn)配現(xiàn)用（用前15分鐘配制）； 原則是：試劑盒上沒有指出配制物的儲藏方式的話，應(yīng)該現(xiàn)配現(xiàn)用；不要怕麻煩；還有小瓶的管子開蓋前要離心，以免蓋子上粘連以后總量不夠。
小鼠ELISA試劑盒有著穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性，簡化操作步驟并且有著高重復(fù)性使用等諸多優(yōu)點，在ELISA試驗中得到了廣泛的應(yīng)用，但是在具體操作中還是要嚴謹認真的遵循說明書要求。
