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閱讀:482發(fā)布時間:2015-5-24
原代培養(yǎng)也稱初代培養(yǎng),嚴格地說即從體內(nèi)取出組織接種培養(yǎng)到*次傳代階段,但實際上,通常把*代至第十代以內(nèi)的培養(yǎng)細胞統(tǒng)稱為原代細胞培養(yǎng)。一般持續(xù)1一4周。此期細胞呈活躍的移動,可見細胞分裂,但不旺盛。初代培養(yǎng)細胞與體內(nèi)原組織在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動上相似性大。細胞群是異質(zhì)的,也即各細胞的遺傳性狀互不相同,細胞相互依存性強。如把這種細胞群稀釋分散成單細胞,在軟瓊脂培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)時,細胞克隆形成率很低,即細胞獨立生存性差??寺⌒纬陕始醇毎罕幌♂尫稚⒊蓡蝹€細胞進行培養(yǎng)時,形成細胞小群的百分數(shù)。初代培養(yǎng)細胞多呈二倍體核型;由于原代培養(yǎng)細胞和體內(nèi)細胞性狀相似性大,是檢測藥物很好的實驗對象。
zui常用的原代培養(yǎng)有組織塊培養(yǎng)和分散細胞培養(yǎng)。
組織塊培養(yǎng)是將剪碎的組織塊直接移植在培養(yǎng)瓶壁上,加入培養(yǎng)基后進行培養(yǎng)。分散細胞培養(yǎng)則是將組織塊用機械法或化學(xué)法使細胞分散。如欲從胎兒或新生兒的組織分離到活性的游離細胞,經(jīng)典的方法是用蛋白水解酶消化細胞間的結(jié)合物,或用金屬離子螯合劑除去細胞互相粘著所依賴的Ca2+,再經(jīng)機械輕度振蕩,使之成為單細胞。
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