人 (Human) 一氧化氮 (NO) ELISA 檢測試劑盒
本試劑僅供研究使用 標(biāo)本：血清或血漿
試驗(yàn)原理：
NO試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知NO濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將NO和*標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中NO的濃度呈比例關(guān)系。
試劑盒內(nèi)容及其配制
試劑盒成份（2-8℃保存） 96孔配置 48孔配置 配制
96/48人份酶標(biāo)板 1塊板（96T） 半塊板（48T） 即用型
塑料膜板蓋 1塊 半塊 即用型
標(biāo)準(zhǔn)品：80umol/L 1瓶（0.6ml） 1瓶（0.3ml） 按說明書進(jìn)行稀稀
空白對(duì)照 1瓶（1.0ml） 1瓶（0.5ml） 即用型
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液 1瓶（5ml） 1瓶（2.5ml） 即用型
*標(biāo)記的抗NO抗體 1瓶（6ml） 1瓶（3.0ml） 即用型
親和鏈酶素-HRP 1瓶（10ml） 1瓶（5.0ml） 即用型
洗滌緩沖液 1瓶（20ml） 1瓶（10ml） 按說明書進(jìn)行稀釋
底物A 1瓶（6.0ml） 1瓶（3.0ml） 即用型
底物B 1瓶（6.0ml） 1瓶（3.0ml） 即用型
終止液 1瓶（6.0ml） 1瓶（3.0ml） 即用型
標(biāo)本稀釋液 1瓶（12ml） 1瓶（6.0ml） 即用型
自備材料
蒸餾水。
加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
振蕩器及磁力攪拌器等。
安全性
避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請(qǐng)盡快用水沖洗。
實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
人 (Human) 一氧化氮 (NO) ELISA 檢測試劑盒操作注意事項(xiàng)
試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
樣品收集、處理及保存方法
血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液
保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
試劑的準(zhǔn)備
標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備，不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行：
80 umol/L （6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品） 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。
40 umol/L （5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品） 100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
20 umol/L （4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品） 100ul的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
10 umol/L （3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品） 100ul的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
5.0 umol/L （2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品） 100ul的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2.5 umol/L （1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品） 100ul的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
0 umol/L （空白對(duì)照） 原始濃度不用稀釋直接加入50ul。
洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。
操作步驟
使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的*標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí)。
甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
在450nm波長處測定各孔的OD值。
建議使用的實(shí)驗(yàn)方案
標(biāo)準(zhǔn)品濃度（umol/L）
A 80 80 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
B 40 40 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
C 20 20 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
D 10 10 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
E 5.0 5.0 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
F 2.5 2.5 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
G 0 0 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
H 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
局限
6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到的結(jié)果。
人 (Human) 一氧化氮 (NO) ELISA 檢測試劑盒性能
1. 靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
3. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
結(jié)果判斷與分析
1、儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的NO標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的NO含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。
3、檢測值范圍：0-80umol/L
4、敏感度： 0.1 umol/L
A02157 大鼠CD3分子(CD3)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： Rat Cluster of differentiation 3,CD3 ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
A02158 大鼠c-Jun氨基末端激酶(JNK)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： Rat c-Jun N-terminal kinases,JNK ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
A02159 大鼠高鐵血紅蛋白(MHB)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： Rat Methemoglobin,MHB ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
A02160 大鼠二銨氧化酶(DAO)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： Rat diamine oxidase,DAO ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
A02161 大鼠褪黑素(MT/MLT)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： Rat Melatonin,MT/MLT ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
A02162 大鼠成纖維細(xì)胞生長因子10(FGF-10)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： Rat fibroblast growth factor-10,FGF-10 ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
A02163 大鼠分泌型磷脂酶A2(sPLA2)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： Rat secreted phospholipase A2,sPLA2 ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
A02164 大鼠胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： Rat Cytosolic Phospholipase A2,cPLA2 ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
A02165 大鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： Rat Cross-linked Carboxy-terminal opeptide of type Ⅰ collagen,ⅠCTP ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
A02166 大鼠肌鈣蛋白T(Tn-T)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： Rat Troponin T,Tn-T ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
A02167 大鼠CD8分子(CD8)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： Rat cluster of differentiation 8,CD8 ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
A02168 大鼠表皮生長因子受體(EGFR)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： Rat epidermal growth factor receptor,EGFR ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
A02169 大鼠白介素2可溶性受體(IL-2sR)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： Rat soluble Interleukin 2 recepter,IL-2sR ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
A02170 大鼠軸突生長誘向因子1(Ntn1)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： Rat Netrin-1,Ntn1 ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
A02171 大鼠乳酸脫氫酶(LDH)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： Rat Lactate Dehydrogenase,LDH ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
A02172 大鼠抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體(MAG Ab)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： Rat anti-myelin associated glycoprotein antibody,MAG Ab ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
A02173 大鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： Rat C-opeptide of type Ⅰ collagen,CTX-Ⅰ ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
A02174 大鼠磷酸化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： Rat phospho-inhibitory subunit of NF-κBα,pIKBα ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
A02175 大鼠核因子κB(NF-κB)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： Rat Nuclear factor-kappa B,NF-κB ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
A02176 大鼠樹突狀細(xì)胞表面特異性C型凝集素-細(xì)胞間黏附分子3結(jié)合非整合素分子(DC-SIGN/CD209) ，英文名： Rat DC specific intercellular adhesion molecule 3-grabbing nonintegrin,DC-SIGN/CD209 ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
A02177 大鼠Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： Rat procollagen Ⅰ N-terminal peptide,PⅠNP ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
A02178 大鼠解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： Rat A Disintegrin And Metalloprotease 9,ADAM9 ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
A02179 大鼠c-fos 酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： Rat c-fos ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
A02180 大鼠c-jun 酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： Rat c-jun ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
A02181 大鼠可溶性白介素6受體(sIL-6R)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： Rat soluble Interleukin 6 receptor,sIL-6R ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
A02182 大鼠吡啶酚(PYD)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： Rat Pyridinoline,PYD ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
A02183 大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(BACE2)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： Rat beta-site APP-cleaving enzyme 2,BACE2 ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
A02184 大鼠骨堿性磷酸酶(BALP)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： Rat bone alkaline phosphatase,BALP ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
A02185 大鼠凝聚素(CLU)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： Rat Clusterin,CLU ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
A02186 大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β刺激蛋白22(TSC22)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： Rat transforming growth factor-beta-stimulated Protein clone-22,TSC22 ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
A02187 大鼠白介素32(IL-32)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： Rat Interleukin 32,IL-32 ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
A02188 大鼠孕酮受體(PROGR)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： Rat Progesterone receptor,PROGR ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
A02189 大鼠白介素21(IL-21)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： Rat Interleukin 21,IL-21 ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
A02190 大鼠D-乳酸脫氫酶(D-LDH)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： Rat D-Lactate Dehydrogenase,D-LDH ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
A02191 大鼠胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TARC/CCL17)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： Rat thymus activation regulated chemokine,TARC ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
A02192 大鼠*(CH)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： Rat cholesterol,CH ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
A02193 大鼠甘油三酯(TG)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： Rat Triglyceride,TG ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
A02194 大鼠低密度脂蛋白(LDL)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： Rat low density lipoprotein,LDL ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
A02195 大鼠高密度脂蛋白(HDL)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： Rat High density lipoprotein,HDL ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
A02196 大鼠孕酮受體(PGR)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： Rat progesterone receptor,PGR ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
A02197 大鼠血管緊張素Ⅱ轉(zhuǎn)化酶(ACEⅡ)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： Rat Angiotensin Ⅱ converting enzyme,ACEⅡ ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
A02198 大鼠血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶(ACEⅠ)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： Rat Angiotensin Ⅰ Converting Enzyme,ACEⅠ ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
A02199 大鼠*釋放激素受體(GnRHR)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： Rat Gonadotropin-releasing hormone receptor,GnRHR ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
A02200 大鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： Rat Phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
A02201 大鼠熱休克蛋白47(HSP47)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： Rat heat shock protein,HSP47 ELISA Kit ，規(guī)格： 96T/48T
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