大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)ELISA試劑盒 Rat matrix metalloproteinase 13,MMP-13 ELISA Kit ，規(guī)格：96T/48T，產(chǎn)品別名： 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)檢測試劑盒
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)ELISA試劑盒原理的簡要說明書：MMP-13(基質(zhì)金屬蛋白酶-13)，為MMPs家族?；|(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinases, MMPs)是一個高度保守且依賴于鋅離子的內(nèi)切蛋白水解酶家族，其中MMP-13屬于MMPs中的膠原酶亞家族，又稱為膠原酶3 (collagenase-3)，可以降解細胞外基質(zhì)中的Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ，Ⅴ型膠原和蛋白酶，因此MMP-13的表達增強有利于細胞外基質(zhì)降解，可能與惡性腫瘤浸潤，轉(zhuǎn)移及預(yù)后相關(guān)。
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)ELISA試劑盒操作步驟
1．使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
2．根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空轉(zhuǎn)移趨化生長因子β1孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
3．加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的*標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。
4．甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
5．每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
6．甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
7．每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
8．取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
9．在450nm波長處測定各孔的OD值。
