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技術(shù)文章

豬促黃體生成素(LH)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書

閱讀:637發(fā)布時(shí)間:2015-8-17

豬促黃體生成素(LH)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
使用目的:
本試劑盒用于測定豬血清、血漿及相關(guān)液體樣本中促黃體生成素(LH)含量。
豬促黃體生成素(LH)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中豬促黃體生成素(LH)
成素(LH)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入促黃體生成素(LH),
再與  HRP 標(biāo)記的促黃體生成素(LH)抗體    ,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*
。用純化的豬促黃體生
洗滌后加底物 TMB顯色。TMB在   HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui
終的黃色。顏色的深淺和樣品中的促黃體生成素(LH)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在  450nm  波長下
測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中豬促黃體生成素(LH)濃度。
豬促黃體生成素(LH)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書試劑盒組成
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能
馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因   NaN3抑制辣根過
(HRP)活性。
操作步驟
150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入  150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
150μl的  5號標(biāo)準(zhǔn)品加入  150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
150μl的  4號標(biāo)準(zhǔn)品加入  150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
150μl的  3號標(biāo)準(zhǔn)品加入  150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
150μl的  2號標(biāo)準(zhǔn)品加入  150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
然后再加待測樣品 10μl(樣品zui終稀釋度為 5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡

量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
溫育:用封板膜封板后
加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。
溫育:操作同 3。
洗滌:操作同 5。
顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
10分鐘.
10.終止:每孔加終止液    50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。測定應(yīng)在加終止
液后 15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。 

即為樣品的實(shí)際濃度。
豬促黃體生成素(LH)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書注意事項(xiàng)
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未
用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì)有
析出,稀釋時(shí)可在浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間
控制在 5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本  OD值
大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的 OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)
算時(shí)請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉
6.底物請避光保存。
7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
豬促黃體生成素(LH)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6個(gè)月


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