基礎膽汁液態(tài)培養(yǎng)基
絕大多數(shù)培養(yǎng)基是建立在*(BSS)基礎上，添加了氨基酸、維生素和其它與血清中濃度相似的營養(yǎng)物質。zui廣泛應用的培養(yǎng)基是Eearle`s MEM 的混合物，其中含有13種必須氨基酸、8種維生素。而Ham`s F12 也包括非必須氨基酸，維生素的范圍亦很廣，另外常規(guī)含有無機鹽和代謝添加劑（例如核苷酸）。MEM/F12 這兩種培養(yǎng)基各取1/2，形成神經生物學zui通用的培養(yǎng)基。Dulbecco`s改良培養(yǎng)基——DMEM，現(xiàn)應用于快速生長的細胞，同MEM含有相同的營養(yǎng)成分，但濃度高出2~4倍。選擇某種培養(yǎng)基，應仔細了解成分表，應知道大多數(shù)情形下培養(yǎng)基都有不足。例如，有些培養(yǎng)基在氨基酸中包括有*，而這種培養(yǎng)基雖廣泛用于神經生物學領域，但它對某些對*敏感的可能有細胞外毒性損傷的神經元而言，則并非*選擇，特別是如果神經元生長在缺乏膠質的環(huán)境中時。F12中含有*，據(jù)報道也有神經毒效應。
膽汁液態(tài)培養(yǎng)基 制備方法：
1. 培養(yǎng)同源細胞（未克隆前時的同一細胞）至半?yún)R合狀態(tài)時，更換一次培養(yǎng)液，再繼續(xù)培養(yǎng)24~48小時后，吸出所有培養(yǎng)液。
2. 離心：3000~4000/分離心10分鐘，吸取上清液。
3. 濾過：再經直徑0.22μm濾孔的濾膜過濾，低溫凍存貯備用；用時取1分適應培養(yǎng)基+2培養(yǎng)基混合使用。
生長因子絕大多數(shù)哺乳類胚胎神經元有嚴格的營養(yǎng)要求，若不能提供適宜的生長因子或合適的因子組分，將會使絕大多數(shù)神經元在體外培養(yǎng)的數(shù)天中死亡。解決這一問題有兩條思路，一是讓培養(yǎng)細胞提供自己的營養(yǎng)因子，二是在 中加入純的生長因子。如果細胞混合物能在高密度時生長，所需的生長因子便會積累到可觀的數(shù)值，尤其當培養(yǎng)基很少變化時。若某種細胞混合物生長時有很少的營養(yǎng)需求，可保持培養(yǎng)基在一段時間里不作任何變動，以使營養(yǎng)（生長）因子積累，而zui后促使所需要的細胞類型能夠生長。但是，這種對營養(yǎng)（生長）因子自身倚賴性亦有弊端，因為通常在混合細胞群體中細胞很難有同比例增殖，某些細胞會因生長條件的貧乏而受限制。另外，這種方法只能進行相當高密度的細胞培養(yǎng)。因為培養(yǎng)基的條件在細胞的較低密度時變的不夠有效。不過某些時候純化神經元群體的低密度培養(yǎng)可用條件培養(yǎng)基（經過了高密度培養(yǎng)）進行，或在膠質上生長的神經元所用過的培養(yǎng)基來支持。
滿足神經元營養(yǎng)需求的第二條途徑是向培養(yǎng)基中加入生長因子。通常用于組培的通用適宜因子是神經生長因子NGF。不過，只有少數(shù)對這種蛋白質有反應的細胞類型的細胞才能生長。
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