基礎(chǔ)支原體半流體培養(yǎng)基

絕大多數(shù)培養(yǎng)基是建立在*(BSS)基礎(chǔ)上，添加了氨基酸、維生素和其它與血清中濃度相似的營養(yǎng)物質(zhì)。zui廣泛應(yīng)用的培養(yǎng)基是Eearle`s MEM 的混合物，其中含有13種必須氨基酸、8種維生素。而Ham`s F12 也包括非必須氨基酸，維生素的范圍亦很廣，另外常規(guī)含有無機(jī)鹽和代謝添加劑（例如核苷酸）。MEM/F12 這兩種培養(yǎng)基各取1/2，形成神經(jīng)生物學(xué)zui通用的培養(yǎng)基。Dulbecco`s改良培養(yǎng)基——DMEM，現(xiàn)應(yīng)用于快速生長的細(xì)胞，同MEM含有相同的營養(yǎng)成分，但濃度高出2~4倍。選擇某種培養(yǎng)基，應(yīng)仔細(xì)了解成分表，應(yīng)知道大多數(shù)情形下培養(yǎng)基都有不足。例如，有些培養(yǎng)基在氨基酸中包括有*，而這種培養(yǎng)基雖廣泛用于神經(jīng)生物學(xué)領(lǐng)域，但它對某些對*敏感的可能有細(xì)胞外毒性損傷的神經(jīng)元而言，則并非*選擇，特別是如果神經(jīng)元生長在缺乏膠質(zhì)的環(huán)境中時(shí)。F12中含有*，據(jù)報(bào)道也有神經(jīng)毒效應(yīng)。

支原體半流體培養(yǎng)基制備方法：

1. 培養(yǎng)同源細(xì)胞（未克隆前時(shí)的同一細(xì)胞）至半?yún)R合狀態(tài)時(shí)，更換一次培養(yǎng)液，再繼續(xù)培養(yǎng)24~48小時(shí)后，吸出所有培養(yǎng)液。

2. 離心：3000~4000/分離心10分鐘，吸取上清液。

3. 濾過：再經(jīng)直徑0.22μm濾孔的濾膜過濾，低溫凍存貯備用；用時(shí)取1分適應(yīng)培養(yǎng)基+2培養(yǎng)基混合使用。

生長因子絕大多數(shù)哺乳類胚胎神經(jīng)元有嚴(yán)格的營養(yǎng)要求，若不能提供適宜的生長因子或合適的因子組分，將會使絕大多數(shù)神經(jīng)元在體外培養(yǎng)的數(shù)天中死亡。解決這一問題有兩條思路，一是讓培養(yǎng)細(xì)胞提供自己的營養(yǎng)因子，二是在中加入純的生長因子。如果細(xì)胞混合物能在高密度時(shí)生長，所需的生長因子便會積累到可觀的數(shù)值，尤其當(dāng)培養(yǎng)基很少變化時(shí)。若某種細(xì)胞混合物生長時(shí)有很少的營養(yǎng)需求，可保持培養(yǎng)基在一段時(shí)間里不作任何變動，以使?fàn)I養(yǎng)（生長）因子積累，而zui后促使所需要的細(xì)胞類型能夠生長。但是，這種對營養(yǎng)（生長）因子自身倚賴性亦有弊端，因?yàn)橥ǔＴ诨旌霞?xì)胞群體中細(xì)胞很難有同比例增殖，某些細(xì)胞會因生長條件的貧乏而受限制。另外，這種方法只能進(jìn)行相當(dāng)高密度的細(xì)胞培養(yǎng)。因?yàn)榕囵B(yǎng)基的條件在細(xì)胞的較低密度時(shí)變的不夠有效。不過某些時(shí)候純化神經(jīng)元群體的低密度培養(yǎng)可用條件培養(yǎng)基（經(jīng)過了高密度培養(yǎng)）進(jìn)行，或在膠質(zhì)上生長的神經(jīng)元所用過的培養(yǎng)基來支持。

滿足神經(jīng)元營養(yǎng)需求的第二條途徑是向培養(yǎng)基中加入生長因子。通常用于組培的通用適宜因子是神經(jīng)生長因子NGF。不過，只有少數(shù)對這種蛋白質(zhì)有反應(yīng)的細(xì)胞類型的細(xì)胞才能生長。

相關(guān)產(chǎn)品如下：hz0032    豬骨髓間質(zhì)干細(xì)胞,Pig MSC細(xì)胞
hz0033    豬睪丸細(xì)胞系 ST細(xì)胞
hz0034    豬肺泡巨噬細(xì)胞,3D4/21細(xì)胞
hz0035    豬鼻甲黏膜成纖維細(xì)胞,PT-K75細(xì)胞
hz0036    皺褶青霉
hz0037    中華根霉
hz0038    中國倉鼠體細(xì)胞,R 1610(細(xì)胞
hz0039    中國倉鼠腎細(xì)胞(二氫*還原酶缺陷型) CHO/dhFr-細(xì)胞
hz0040    中國倉鼠卵巢細(xì)胞,CTLA4 Ig-24細(xì)胞
hz0041    中國倉鼠卵巢細(xì)胞,CHO細(xì)胞,
hz0042    中國倉鼠肺細(xì)胞,V79細(xì)胞
hz0043    中國倉鼠肺細(xì)胞,V79-4細(xì)胞
hz0044    中國倉鼠肺細(xì)胞,CHL細(xì)胞
hz0045    中國倉鼠肺細(xì)胞,CHL/IU [ CHL-11 ]細(xì)胞
hz0046    中國倉鼠二氫*還原酶缺陷細(xì)胞,CHO/dhFr-細(xì)胞
hz0047    中國倉鼠倉鼠卵巢細(xì)胞亞株 CHO-K1細(xì)胞
hz0048    中國倉鼠倉鼠肺細(xì)胞,R1610細(xì)胞
hz0049    中國倉鼠X小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤 MR1細(xì)胞,
hz0050    致病性大腸埃希氏菌
hz0051    植物乳桿菌
hz0052    正常小鼠睪丸Sertoli細(xì)胞,TM4細(xì)胞
hz0053    正常小鼠睪丸Leydig細(xì)胞,TM3細(xì)胞
hz0054    正常人肝細(xì)胞,L-02細(xì)胞
hz0055    正常大鼠腎細(xì)胞,NRK細(xì)胞
hz0056    整合SV40 基因的乳腺上皮細(xì)胞,HBL-100細(xì)胞
hz0057    赭曲霉
hz0058    赭綠青霉
hz0059    沼澤紅假單胞菌
hz0060    張氏肝細(xì)胞,HeLa [ Chang Liver ]細(xì)胞
hz0061    粘質(zhì)沙雷氏菌