基礎(chǔ)腦心浸出液肉湯(BHI)
絕大多數(shù)培養(yǎng)基是建立在*(BSS)基礎(chǔ)上,添加了氨基酸、維生素和其它與血清中濃度相似的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。zui廣泛應(yīng)用的培養(yǎng)基是Eearle`s MEM 的混合物,其中含有13種必須氨基酸、8種維生素。而Ham`s F12 也包括非必須氨基酸,維生素的范圍亦很廣,另外常規(guī)含有無(wú)機(jī)鹽和代謝添加劑(例如核苷酸)。MEM/F12 這兩種培養(yǎng)基各取1/2,形成神經(jīng)生物學(xué)zui通用的培養(yǎng)基。Dulbecco`s改良培養(yǎng)基——DMEM,現(xiàn)應(yīng)用于快速生長(zhǎng)的細(xì)胞,同MEM含有相同的營(yíng)養(yǎng)成分,但濃度高出2~4倍。選擇某種培養(yǎng)基,應(yīng)仔細(xì)了解成分表,應(yīng)知道大多數(shù)情形下培養(yǎng)基都有不足。例如,有些培養(yǎng)基在氨基酸中包括有*,而這種培養(yǎng)基雖廣泛用于神經(jīng)生物學(xué)領(lǐng)域,但它對(duì)某些對(duì)*敏感的可能有細(xì)胞外毒性損傷的神經(jīng)元而言,則并非*選擇,特別是如果神經(jīng)元生長(zhǎng)在缺乏膠質(zhì)的環(huán)境中時(shí)。F12中含有*,據(jù)報(bào)道也有神經(jīng)毒效應(yīng)。
腦心浸出液肉湯(BHI)制備方法:
1. 培養(yǎng)同源細(xì)胞(未克隆前時(shí)的同一細(xì)胞)至半?yún)R合狀態(tài)時(shí),更換一次培養(yǎng)液,再繼續(xù)培養(yǎng)24~48小時(shí)后,吸出所有培養(yǎng)液。
2. 離心:3000~4000/分離心10分鐘,吸取上清液。
3. 濾過(guò):再經(jīng)直徑0.22μm濾孔的濾膜過(guò)濾,低溫凍存貯備用;用時(shí)取1分適應(yīng)培養(yǎng)基+2培養(yǎng)基混合使用。
生長(zhǎng)因子絕大多數(shù)哺乳類(lèi)胚胎神經(jīng)元有嚴(yán)格的營(yíng)養(yǎng)要求,若不能提供適宜的生長(zhǎng)因子或合適的因子組分,將會(huì)使絕大多數(shù)神經(jīng)元在體外培養(yǎng)的數(shù)天中死亡。解決這一問(wèn)題有兩條思路,一是讓培養(yǎng)細(xì)胞提供自己的營(yíng)養(yǎng)因子,二是在腦心浸出液肉湯(BHI)中加入純的生長(zhǎng)因子。如果細(xì)胞混合物能在高密度時(shí)生長(zhǎng),所需的生長(zhǎng)因子便會(huì)積累到可觀(guān)的數(shù)值,尤其當(dāng)培養(yǎng)基很少變化時(shí)。若某種細(xì)胞混合物生長(zhǎng)時(shí)有很少的營(yíng)養(yǎng)需求,可保持培養(yǎng)基在一段時(shí)間里不作任何變動(dòng),以使?fàn)I養(yǎng)(生長(zhǎng))因子積累,而zui后促使所需要的細(xì)胞類(lèi)型能夠生長(zhǎng)。但是,這種對(duì)營(yíng)養(yǎng)(生長(zhǎng))因子自身倚賴(lài)性亦有弊端,因?yàn)橥ǔT诨旌霞?xì)胞群體中細(xì)胞很難有同比例增殖,某些細(xì)胞會(huì)因生長(zhǎng)條件的貧乏而受限制。另外,這種方法只能進(jìn)行相當(dāng)高密度的細(xì)胞培養(yǎng)。因?yàn)榕囵B(yǎng)基的條件在細(xì)胞的較低密度時(shí)變的不夠有效。不過(guò)某些時(shí)候純化神經(jīng)元群體的低密度培養(yǎng)可用條件培養(yǎng)基(經(jīng)過(guò)了高密度培養(yǎng))進(jìn)行,或在膠質(zhì)上生長(zhǎng)的神經(jīng)元所用過(guò)的培養(yǎng)基來(lái)支持。
滿(mǎn)足神經(jīng)元營(yíng)養(yǎng)需求的第二條途徑是向培養(yǎng)基中加入生長(zhǎng)因子。通常用于組培的通用適宜因子是神經(jīng)生長(zhǎng)因子NGF。不過(guò),只有少數(shù)對(duì)這種蛋白質(zhì)有反應(yīng)的細(xì)胞類(lèi)型的細(xì)胞才能生長(zhǎng)。
腦心浸出液肉湯(BHI)相關(guān)產(chǎn)品如下:hz0124 人食管癌細(xì)胞 TE-1
hz0125 人食管癌細(xì)胞 TE-10
hz0126 人食管癌細(xì)胞 TE-11
hz0127 人胃癌細(xì)胞 NCI-N87 [N87]
hz0128 人胃癌細(xì)胞 MGC80-3
hz0129 人胃癌細(xì)胞(未分化) HGC-27
hz0130 人胃腺癌細(xì)胞 AGS
hz0131 人胃腺癌細(xì)胞 SGC-7901
hz0132 人胃腺癌細(xì)胞(低分化) BGC-823
hz0133 人肝癌細(xì)胞 BEL-7402
hz0134 人肝癌細(xì)胞 BEL-7404
hz0135 人肝癌細(xì)胞 BEL-7405
hz0136 人肝癌細(xì)胞 Hep 3B2.1-7
hz0137 人肝癌細(xì)胞 Hep G2
hz0138 人肝癌細(xì)胞 QGY-7701
hz0139 人肝癌細(xì)胞 QGY-7703
hz0140 人肝癌細(xì)胞 SK-HEP-1
hz0141 人肝癌細(xì)胞 SMMC-7721
hz0142 人肝癌亞力山大細(xì)胞 PLC/PRF/5
hz0143 人張氏肝細(xì)胞 Chang liver
hz0144 人肝細(xì)胞 HL-7702[L-02]
hz0145 人肝癌細(xì)胞 Li-7
hz0146 人肝癌細(xì)胞 HuH-7
hz0147 人肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞 HuH-6
hz0148 人肝膽管癌細(xì)胞 RBE
hz0149 人肝細(xì)胞 QSG-7701
hz0150 人肝永生化細(xì)胞 THLE-3
hz0151 人膽管細(xì)胞型肝癌細(xì)胞 HCCC-9810
hz0152 人膽囊癌細(xì)胞 GBC-SD