檢測原理普通變形桿菌
細(xì)胞發(fā)生凋亡或壞死，其細(xì)胞DNA均發(fā)生斷裂，細(xì)胞內(nèi)小分子量DNA斷增加，高分子DNA減少，胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)DNA斷。但凋亡細(xì)胞DNA斷裂點均有規(guī)律的發(fā)生在核小體之間，出現(xiàn)180－200bpDNA斷，而壞死細(xì)胞的DNA斷裂點為無特征的雜亂片斷，利用此特征可以確定群體細(xì)胞的死亡，并可與壞死細(xì)胞區(qū)別，細(xì)胞繁殖以分裂方式進行。細(xì)胞作為一個獨立生命單位，既有生長繁殖，也有衰老死亡。細(xì)胞衰老是生物有機體衰老的基礎(chǔ)。在多細(xì)胞生物的個體發(fā)育過程中，細(xì)胞常常分化成各種構(gòu)造和功能不同的細(xì)胞，如肌細(xì)胞、紅細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞等都屬于高度分化的細(xì)胞。當(dāng)細(xì)胞發(fā)生癌變時，細(xì)胞便喪失其原來正常的功能，并無休止地分裂，形成腫瘤。
普通變形桿菌操作方法
固定 | 培養(yǎng)細(xì)胞的制片或冰凍切片用4%多聚甲醛固定30min(4℃)后，用80%酒精再固定2h（-20℃）。常規(guī)4%中性福爾馬林固定、石蠟包埋之切片進行脫蠟、水化。 |
洗滌 | 玻片浸入PBS緩沖液，搖床上洗滌5min，三次。 |
反應(yīng) | 洗滌后的玻片用吸水紙吸干細(xì)胞或組織周圍水分，按50μl/cm2滴加反應(yīng)液（每50μL反應(yīng)液含TdT酶0.5μL,標(biāo)記的-dUTP 1μL），使反應(yīng)液均勻地覆蓋于所有細(xì)胞或組織切片上，蓋上塑料蓋玻片，置濕盒中，37℃孵育1h。 |
終止反應(yīng) | 去掉塑料蓋玻片，將玻片置盛有洗滌緩沖液的染色缸內(nèi)，洗滌兩次，每次5min。 |
FITC標(biāo)記 | 洗滌后的玻片用吸水紙吸去細(xì)胞或組織周圍水分，按50μl/cm2滴加FITC反應(yīng)液（含FITC 2.5μg/mL），室溫下避光孵育10min。 |
洗滌 | 將玻片置于洗滌緩沖液內(nèi)，洗兩次，每次5min。 |
PI復(fù)染 | 將玻片置于盛有PI染液的染色缸內(nèi)，室溫下避光染色30min。 |
封片 | 用蓋玻片直接蓋在含PI染液的玻片上，亦可用無色指甲油涂于蓋玻片四周邊緣，置暗盒中，盡早鏡檢觀察。 |
交貨時間 | 15~20天 |
傳代：
1.培養(yǎng)皿中的細(xì)胞覆蓋率達到80%-90%時要傳代。
2.把原有培養(yǎng)基吸掉。
3.加適當(dāng)?shù)?(能覆蓋細(xì)胞就行)，消化1-2分鐘。
4.細(xì)胞都變圓后加如入等體積的含血清的培養(yǎng)基終止消化。
5.用移液槍吹打細(xì)胞，把細(xì)胞都懸浮起來。
6.把細(xì)胞吸到15ml的離心管中，1000轉(zhuǎn)離心5分鐘。
7.倒掉上清液，加1-2ml培養(yǎng)基，把細(xì)胞都吹起來。
相關(guān)產(chǎn)品如下：hz-1101 DU145(前列腺癌細(xì)胞)
hz-1102 Lncap(前列腺癌細(xì)胞)
hz-1103 PC-3(前列腺癌細(xì)胞)
hz-1104 MOLT-4(急性淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞)
hz-1105 5637(膀胱癌細(xì)胞)
hz-1106 Raji(Burkitt's 淋巴瘤細(xì)胞)
hz-1107 SCaBER(膀胱鱗癌細(xì)胞)
hz-1108 NAMALWA(Burkitt's 淋巴瘤細(xì)胞)
hz-1109 T24(膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞)
hz-1110 HuT78(T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞)
hz-1111 SW-13(腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞 )
hz-1112 SW-13(腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞 )
hz-1113 Dami(巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞)
hz-1114 OS-RC-2(腎癌細(xì)胞)
hz-1115 MEG-01
hz-1116 786-O [786-0](腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞)
hz-1117 786-O [786-0](腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞)
hz-1118 K-562(慢性髓原白血病細(xì)胞)
hz-1119 K-562(慢性髓原白血病細(xì)胞)
hz-1120 Hce-8693(盲腸腺癌細(xì)胞(未分化))
hz-1121 HEL299(紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞)
hz-1122 CW-2(結(jié)腸腺癌細(xì)胞)
hz-1123 A-375 [A375](惡性黑色素瘤細(xì)胞)
hz-1124 COLO-320(結(jié)腸腺癌細(xì)胞)
hz-1125 A172(膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)
hz-1126 SW480 [SW-480](結(jié)腸癌細(xì)胞)
hz-1127 SHG-44(膠質(zhì)瘤細(xì)胞)
hz-1128 Caco-2(結(jié)腸腺癌細(xì)胞)
hz-1129 Caco-2(結(jié)腸腺癌細(xì)胞)
hz-1130 U251(膠質(zhì)瘤細(xì)胞)
hz-1131 LS 174T(結(jié)腸腺癌細(xì)胞)
hz-1132 SK-N-MC(神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞)
hz-1133 SK-N-MC(神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞)
hz-1134 BxPC-3(原位胰腺腺癌細(xì)胞)
hz-1135 BxPC-3(原位胰腺腺癌細(xì)胞)
hz-1136 KP-N-NS(腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞(腦轉(zhuǎn)移))
hz-1137 AsPC-1(轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細(xì)胞)
