檢測(cè)原理青春雙歧桿菌
細(xì)胞發(fā)生凋亡或壞死，其細(xì)胞DNA均發(fā)生斷裂，細(xì)胞內(nèi)小分子量DNA斷增加，高分子DNA減少，胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)DNA斷。但凋亡細(xì)胞DNA斷裂點(diǎn)均有規(guī)律的發(fā)生在核小體之間，出現(xiàn)180－200bpDNA斷，而壞死細(xì)胞的DNA斷裂點(diǎn)為無(wú)特征的雜亂片斷，利用此特征可以確定群體細(xì)胞的死亡，并可與壞死細(xì)胞區(qū)別，細(xì)胞繁殖以分裂方式進(jìn)行。細(xì)胞作為一個(gè)獨(dú)立生命單位，既有生長(zhǎng)繁殖，也有衰老死亡。細(xì)胞衰老是生物有機(jī)體衰老的基礎(chǔ)。在多細(xì)胞生物的個(gè)體發(fā)育過(guò)程中，細(xì)胞常常分化成各種構(gòu)造和功能不同的細(xì)胞，如肌細(xì)胞、紅細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞等都屬于高度分化的細(xì)胞。當(dāng)細(xì)胞發(fā)生癌變時(shí)，細(xì)胞便喪失其原來(lái)正常的功能，并無(wú)休止地分裂，形成腫瘤。
青春雙歧桿菌操作方法
固定 | 培養(yǎng)細(xì)胞的制片或冰凍切片用4%多聚甲醛固定30min(4℃)后，用80%酒精再固定2h（-20℃）。常規(guī)4%中性福爾馬林固定、石蠟包埋之切片進(jìn)行脫蠟、水化。 |
洗滌 | 玻片浸入PBS緩沖液，搖床上洗滌5min，三次。 |
反應(yīng) | 洗滌后的玻片用吸水紙吸干細(xì)胞或組織周?chē)郑?/SPAN>50μl/cm2滴加反應(yīng)液（每50μL反應(yīng)液含TdT酶0.5μL,標(biāo)記的-dUTP 1μL），使反應(yīng)液均勻地覆蓋于所有細(xì)胞或組織切片上，蓋上塑料蓋玻片，置濕盒中，37℃孵育1h。 |
終止反應(yīng) | 去掉塑料蓋玻片，將玻片置盛有洗滌緩沖液的染色缸內(nèi)，洗滌兩次，每次5min。 |
FITC標(biāo)記 | 洗滌后的玻片用吸水紙吸去細(xì)胞或組織周?chē)?，?/SPAN>50μl/cm2滴加FITC反應(yīng)液（含FITC 2.5μg/mL），室溫下避光孵育10min。 |
洗滌 | 將玻片置于洗滌緩沖液內(nèi)，洗兩次，每次5min。 |
PI復(fù)染 | 將玻片置于盛有PI染液的染色缸內(nèi)，室溫下避光染色30min。 |
封片 | 用蓋玻片直接蓋在含PI染液的玻片上，亦可用無(wú)色指甲油涂于蓋玻片四周邊緣，置暗盒中，盡早鏡檢觀察。 |
交貨時(shí)間 | 15~20天 |
傳代：
1.培養(yǎng)皿中的細(xì)胞覆蓋率達(dá)到80%-90%時(shí)要傳代。
2.把原有培養(yǎng)基吸掉。
3.加適當(dāng)?shù)?(能覆蓋細(xì)胞就行)，消化1-2分鐘。
4.細(xì)胞都變圓后加如入等體積的含血清的培養(yǎng)基終止消化。
5.用移液槍吹打細(xì)胞，把細(xì)胞都懸浮起來(lái)。
6.把細(xì)胞吸到15ml的離心管中，1000轉(zhuǎn)離心5分鐘。
7.倒掉上清液，加1-2ml培養(yǎng)基，把細(xì)胞都吹起來(lái)。
相關(guān)產(chǎn)品如下：hz0034 非洲綠猴腎細(xì)胞 Vero
hz0035 非洲綠猴腎細(xì)胞 VERO C1008 (E6)
hz0036 恒河猴胚腎細(xì)胞 FRhK-4
hz0037 恒河猴腎細(xì)胞 LLC-MK2
hz0038 猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細(xì)胞 RF/6A
hz0039 絨猴EBV轉(zhuǎn)化的白細(xì)胞 B95-8
hz0040 負(fù)鼠腎細(xì)胞 OK
hz0041 狗腎細(xì)胞 MDCK(NBL-2)
hz0042 狗腎細(xì)胞 Super Tube
hz0043 雞胚成纖維細(xì)胞 UMNSAH/DF-1
hz0044 雞淋巴瘤細(xì)胞 DT40
hz0045 貓腎細(xì)胞 CRFK
hz0046 貓腎細(xì)胞 F81
hz0047 牛胚氣管細(xì)胞 EBTr (NBL-4)
hz0048 牛腎細(xì)胞 MDBK (NBL-1)
hz0049 袋鼠腎細(xì)胞 Pt K1 (NBL-3)
hz0050 豬髖動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 PIEC
hz0051 小鼠胚胎細(xì)胞 NIH/3T3
hz0052 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 3T3-Swiss albino
hz0053 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 3T6-Swiss albino
hz0054 小鼠SRSV轉(zhuǎn)化的3T3細(xì)胞 SRSV/3T3
hz0055 小鼠Mo-MuLv感染的3T3細(xì)胞 Mo-MuLV/3T3
hz0056 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 BALB/3T3 clone A31
hz0057 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 C3H/10T1/2, Clone 8
hz0058 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 Psi2 DAP
hz0059 小鼠成纖維細(xì)胞 L929
hz0060 小鼠成纖維細(xì)胞 PA317
hz0061 小鼠成肌細(xì)胞 C2C12
hz0062 小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞 A9
hz0063 小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞 L Wnt-3A
hz0064 小鼠黑色素瘤細(xì)胞 B16
hz0065 小鼠皮膚黑色素瘤細(xì)胞 B16-F10
hz0066 小鼠胃癌細(xì)胞 MFC
hz0067 小鼠胚胎肝細(xì)胞 BNL CL.2
hz0068 小鼠胰島內(nèi)皮細(xì)胞 MS1
