檢測(cè)原理清酒酵母
細(xì)胞發(fā)生凋亡或壞死，其細(xì)胞DNA均發(fā)生斷裂，細(xì)胞內(nèi)小分子量DNA斷增加，高分子DNA減少，胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)DNA斷。但凋亡細(xì)胞DNA斷裂點(diǎn)均有規(guī)律的發(fā)生在核小體之間，出現(xiàn)180－200bpDNA斷，而壞死細(xì)胞的DNA斷裂點(diǎn)為無(wú)特征的雜亂片斷，利用此特征可以確定群體細(xì)胞的死亡，并可與壞死細(xì)胞區(qū)別，細(xì)胞繁殖以分裂方式進(jìn)行。細(xì)胞作為一個(gè)獨(dú)立生命單位，既有生長(zhǎng)繁殖，也有衰老死亡。細(xì)胞衰老是生物有機(jī)體衰老的基礎(chǔ)。在多細(xì)胞生物的個(gè)體發(fā)育過(guò)程中，細(xì)胞常常分化成各種構(gòu)造和功能不同的細(xì)胞，如肌細(xì)胞、紅細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞等都屬于高度分化的細(xì)胞。當(dāng)細(xì)胞發(fā)生癌變時(shí)，細(xì)胞便喪失其原來(lái)正常的功能，并無(wú)休止地分裂，形成腫瘤。
清酒酵母操作方法
固定 | 培養(yǎng)細(xì)胞的制片或冰凍切片用4%多聚甲醛固定30min(4℃)后，用80%酒精再固定2h（-20℃）。常規(guī)4%中性福爾馬林固定、石蠟包埋之切片進(jìn)行脫蠟、水化。 |
洗滌 | 玻片浸入PBS緩沖液，搖床上洗滌5min，三次。 |
反應(yīng) | 洗滌后的玻片用吸水紙吸干細(xì)胞或組織周圍水分，按50μl/cm2滴加反應(yīng)液（每50μL反應(yīng)液含TdT酶0.5μL,標(biāo)記的-dUTP 1μL），使反應(yīng)液均勻地覆蓋于所有細(xì)胞或組織切片上，蓋上塑料蓋玻片，置濕盒中，37℃孵育1h。 |
終止反應(yīng) | 去掉塑料蓋玻片，將玻片置盛有洗滌緩沖液的染色缸內(nèi)，洗滌兩次，每次5min。 |
FITC標(biāo)記 | 洗滌后的玻片用吸水紙吸去細(xì)胞或組織周圍水分，按50μl/cm2滴加FITC反應(yīng)液（含FITC 2.5μg/mL），室溫下避光孵育10min。 |
洗滌 | 將玻片置于洗滌緩沖液內(nèi)，洗兩次，每次5min。 |
PI復(fù)染 | 將玻片置于盛有PI染液的染色缸內(nèi)，室溫下避光染色30min。 |
封片 | 用蓋玻片直接蓋在含PI染液的玻片上，亦可用無(wú)色指甲油涂于蓋玻片四周邊緣，置暗盒中，盡早鏡檢觀察。 |
交貨時(shí)間 | 15~20天 |
傳代：
1.培養(yǎng)皿中的細(xì)胞覆蓋率達(dá)到80%-90%時(shí)要傳代。
2.把原有培養(yǎng)基吸掉。
3.加適當(dāng)?shù)?(能覆蓋細(xì)胞就行)，消化1-2分鐘。
4.細(xì)胞都變圓后加如入等體積的含血清的培養(yǎng)基終止消化。
5.用移液槍吹打細(xì)胞，把細(xì)胞都懸浮起來(lái)。
6.把細(xì)胞吸到15ml的離心管中，1000轉(zhuǎn)離心5分鐘。
7.倒掉上清液，加1-2ml培養(yǎng)基，把細(xì)胞都吹起來(lái)。
相關(guān)產(chǎn)品如下：hz0001 倉(cāng)鼠腎成纖維細(xì)胞 BHK-21 [C-13]
hz0002 倉(cāng)鼠肺細(xì)胞 CHL
hz0003 倉(cāng)鼠肺細(xì)胞 V79
hz0004 倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞 CHO
hz0005 倉(cāng)鼠肺細(xì)胞 R 1610
hz0006 倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞,二氫*還原酶缺陷 CHO/dhFr-
hz0007 倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞亞株 CHO-K1
hz0008 倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞 Lec1
hz0009 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞 CTLA4 Ig-24
hz0010 長(zhǎng)尾綠猴胚胎細(xì)胞 4179
hz0011 長(zhǎng)尾綠猴腎細(xì)胞 4647
hz0012 大鼠胸大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 A7r5
hz0013 大鼠成肌細(xì)胞 L6
hz0014 大鼠肺泡巨噬細(xì)胞 NR8383
hz0015 大鼠心肌細(xì)胞 H9c2(2-1)
hz0016 大鼠肝癌細(xì)胞 CBRH-7919
hz0017 大鼠肝癌細(xì)胞 RH-35
hz0018 大鼠肝細(xì)胞 BRL
hz0019 大鼠肝細(xì)胞 BRL 3A
hz0020 大鼠胰腺外分泌細(xì)胞 AR42J
hz0021 大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞 C6
hz0022 大鼠乳腺癌細(xì)胞 SHZ-88
hz0023 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(未分化) PC-12
hz0024 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(低分化) PC-12
hz0025 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(高分化) PC-12
hz0026 大鼠腎細(xì)胞 NRK
hz0027 大鼠腎細(xì)胞 NRK-52E
hz0028 大鼠嗜堿性細(xì)胞白血病細(xì)胞 RBL-2H3
hz0029 大鼠雪旺細(xì)胞 RSC96
hz0030 貂肺上皮細(xì)胞 Mv.1.Lu
hz0031 非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞 COS-1
hz0032 非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞 COS-7
