人單核細(xì)胞白血病THP-1細(xì)胞基本特性
細(xì)胞生長:貼壁生長
細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形
細(xì)胞數(shù)量:1×106個(gè)細(xì)胞數(shù)
細(xì)胞傳代:1:2傳代
人單核細(xì)胞白血病THP-1細(xì)胞的原位染色
(1)貼壁生長的對數(shù)期細(xì)胞鋪在24孔或6孔板中(內(nèi)有潔凈蓋玻片),讓其爬片生長,待長到50%~80%滿時(shí),凋亡誘導(dǎo)劑處理細(xì)胞。
(2)將不同時(shí)間點(diǎn)處理的細(xì)胞進(jìn)行免疫熒光染色,染色步驟同上。
(3)將染色的爬片細(xì)胞放于一張滴有少量甘油(5ml)的載玻片上,熒光顯微鏡或共聚焦激光掃描顯微鏡觀察TFAR19在細(xì)胞中的定位。
臨床病理切片的染色、檢測。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)、檢測。
分析TFAR19蛋白在人體內(nèi)各組織器官的分布及定位
透射電子顯微鏡觀察
結(jié)果評判:凋亡細(xì)胞體積變小,細(xì)胞質(zhì)濃縮。凋亡Ⅰ期(pro-apoptosis nuclei)的細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)高度盤繞,出現(xiàn)許多稱為氣穴現(xiàn)象(cavitations)的空泡結(jié)構(gòu);Ⅱa期細(xì)胞核的染色質(zhì)高度凝聚、邊緣化;細(xì)胞凋亡的晚期,細(xì)胞核裂解為碎塊,產(chǎn)生凋亡小體。
DNA片斷化檢測
細(xì)胞凋亡時(shí)主要的生化特征是其染色質(zhì)發(fā)生濃縮, 染色質(zhì)DNA在核小體單位之間的連接處斷裂, 形成50~300kbp長的DNA大片段, 或180~200bp整數(shù)倍的寡核苷酸片段, 在凝膠電泳上表現(xiàn)為梯形電泳圖譜(DNA ladder)。人單核細(xì)胞白血病THP-1細(xì)胞經(jīng)處理后,采用常規(guī)方法分離提純DNA,進(jìn)行瓊脂糖凝膠和溴化乙啶染色,在凋亡細(xì)胞群中可觀察到典型的DNA ladder。如果細(xì)胞量很少,還可在分離提純DNA后,用32P-ATP和脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶(TdT)使DNA標(biāo)記,然后進(jìn)行電泳和放射自顯影,觀察凋亡細(xì)胞中DNA ladder的形成。
大分子染色體DNA片段的測定
細(xì)胞凋亡的早期,染色體斷裂成為50~300kbp長的DNA大片段。所有超過一定分子量大小的雙鏈DNA分子在瓊脂糖凝膠中的遷移速度相同。線性DNA的雙螺旋半徑超過凝膠半徑時(shí),即達(dá)到分辨力的極限。此時(shí)凝膠不再按分子量的大小來篩分DNA,DNA像通過彎管一樣,以其一端指向電場一極而通過凝膠,這種遷移模式稱之為"爬行"。因此,細(xì)胞凋亡早期產(chǎn)生的50~300kbp長的DNA大片段不能用普通的瓊脂糖凝膠電泳來分離。通常采用脈沖電泳技術(shù)可圓滿地解決這一問題。這個(gè)方法是在凝膠上外加正交的交變脈沖電場。每當(dāng)電場方向改變后,大的DNA分子便滯流在爬行管中,直至新的電場軸向重新定向后,才能繼續(xù)向前移動(dòng)。DNA分子量越大,這種重排所需要的時(shí)間就越長。當(dāng)DNA分子變換方向的時(shí)間小于電脈沖周期時(shí),DNA就可以按其分子量大小分開。
人單核細(xì)胞白血病THP-1細(xì)胞相關(guān)產(chǎn)品如下:
hz1405 猴腎細(xì)胞系 VERO E6細(xì)胞
hz1406 猴腎細(xì)胞系 MA-104細(xì)胞
hz1407 猴腎細(xì)胞系 BSC-1細(xì)胞
hz1408 猴腎細(xì)胞,Marc145細(xì)胞
hz1409 猴腎C M145細(xì)胞
hz1410 猴胚胎腎上皮細(xì)胞,marc-145-EGFP-puro細(xì)胞
hz1411 猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細(xì)胞,RF/6A細(xì)胞
hz1412 猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細(xì)胞, RF/6A細(xì)胞
hz1413 猴的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,MSCS細(xì)胞
hz1414 喉表皮樣癌細(xì)胞,HEp-2細(xì)胞
hz1417 紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞,HEL299細(xì)胞
hz1418 橫紋肌瘤細(xì)胞,A-673細(xì)胞
hz1419 恒河猴腎細(xì)胞,MA-104細(xì)胞
hz1420 恒河猴腎細(xì)胞,LLC-MK2細(xì)胞
hz1421 恒河猴腎細(xì)胞,LLC-MK2細(xì)胞
hz1422 恒河猴胚腎細(xì)胞,FRhK-4細(xì)胞
hz1423 恒河猴胚腎細(xì)胞,FRhK-4細(xì)胞
hz1424 黑色素瘤細(xì)胞,B16細(xì)胞
hz1426 褐鼠胰島素瘤上皮細(xì)胞,RIN-m細(xì)胞,
hz1427 褐球固氮菌
hz1461 睪丸間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞,MLTC-1細(xì)胞
hz1462 高轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞,MHCC97-H細(xì)胞,
hz1463 高轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞,LM3細(xì)胞
hz1464 高轉(zhuǎn)移卵巢癌細(xì)胞,HO-8910PM細(xì)胞
hz1465 高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞,95-D細(xì)胞
hz1466 肝細(xì)胞,HL-7702細(xì)胞
hz1467 肝卵圓細(xì)胞,HOC細(xì)胞
hz1468 肝瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞,HHVEC 細(xì)胞
hz1469 肝癌亞力山大細(xì)胞,PLC/PRF/5細(xì)胞