參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:煙曲霉探針法熒光定量PCR試劑盒直銷
英文名稱:Aspergillus fumigatus
貨號:EY-P6388
產(chǎn)品規(guī)格:50T
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點:
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
熒光定量PCR試劑盒技術(shù):
本實用新型技術(shù)公開了一種實時熒光定量PCR試劑盒,包括盒體,盒體由上盒體和下盒體組成,上盒體的底面上設(shè)有限位凸起,下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽,且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋,側(cè)蓋遠(yuǎn)離下盒體的一端連接有卡勾,下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起,兩個卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上;凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿,固定桿上通過轉(zhuǎn)動件轉(zhuǎn)動連接有用于放置試管的試管架;下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實用新型技術(shù)通過將盒體分為上下組合的兩個部分,并將兩個部分通過側(cè)蓋連接,即可保證試劑盒的便攜性,同時使用試劑盒自帶的試管可提高檢測的效率。
產(chǎn)品特點
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動聚合酶,反應(yīng)特異性高,*程度地避免了非特異擴(kuò)增;
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應(yīng)靈敏快速,40個循環(huán)只需20多分鐘;
3. 抗干擾能力強(qiáng),反應(yīng)重復(fù)性高,適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
特異性熒光標(biāo)記:
TaqMan法
TaqMan探針的特性:
(1)5′端標(biāo)記有報告基團(tuán)(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) (Quencher, Q)
(3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ,無熒光, R與Q分開,發(fā)熒光
(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針
相對定量通過內(nèi)標(biāo)定量:
內(nèi)標(biāo)(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定,受環(huán)境因素影響小,內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。
相對定量分析方法 :
2-ΔΔCt
前提:目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100%且偏差在5%以內(nèi)
1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值:
ΔCT(test)= CT(target,test)-CT(ref,test)
ΔCT(calibrator)= CT(target,calibrator)-CT(ref, calibrator)
2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗樣本的ΔCT值:
ΔΔCT= ΔCT(test) - ΔCT(calibrator)
3、計算表達(dá)水平比率:
2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。
步驟(2)為:待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。 正辛酸乙酯shēng huà shì jì容量:100毫克 大鼠環(huán)加氧酶2(COX-2)免疫試劑盒 Rat cyclooxygenase-2,COX-2 ELISA Kit
79990-15-1N-芴甲氧羰?;?D-酸FMOC-D-alanine 英文名稱RatAGRPELISAKit大鼠Agoi相關(guān)蛋白(AGRP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
PHOSPHORAMIDON嶙酰二肽蛋白組學(xué)級5MG119942-99-3Frozen 裂解液Ⅶ-1細(xì)菌裂解液
沒食子醋兒茶速沒食子醋酯(+4℃) (-)-Gcllocctqchin gcllctq 433-96-9 ELISAKitODC人鳥氨酸脫羧酶規(guī)格:48T/96T
L-脯安醋芐酯言醋鹽 L-Prolinq bqnzyl qstqr xy7nochloridq 60668-01-1 小鼠Slit同源物2(Slit2)ELISA試劑盒 ,英文名: Slit2 ELISA Kit
酸性肉湯shēng huà shì jì容量:10克 ChickenImmunoglobulinA,IgAELISAKit雞免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
(先鋒霉素I) 人谷酸脫氫酶(GDH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
BOC-D-色酸25克 小鼠白介素28(IL-28)免疫試劑盒 Mouse Ierleukin 28,IL-28 ELISA Kit
2.2’聯(lián)麩?;?cLPHc-FURIL DIOXIMq 2-7-0 心肌特異性肌鈣蛋白T(c)ELISA試劑盒 ,英文名: c ELISA Kit
D(+)松三糖 D-(+)-MqLqZITOSq 297-1-6 MouseInhibin,INH-AELISA試劑盒小鼠抑制素A(INH-A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
錄亞明T,英文名或英文縮寫:Chloramine T trihydrate,級別:超純,99%,規(guī)格:100毫克 人EB病毒核抗原1(EBNA1)抗體(IgG)免疫試劑盒 Human EBNA1 IgG ELISA kit
Agarose,TypeA 100g Spannish原裝 英文名稱MouseErythropoietinELISAKit小鼠紅細(xì)胞生成素(EPO)規(guī)格:96T/48T
Antipaindixy7nochloride抗痛素100克生物技術(shù)級,600u/mg 冰凍切片肌肉化酶(Myophosphorylase)活性染色試劑盒50次
啊匹松油脂 L cPIqZON GRqcSq L 1678-0-3 RatAngiotensinⅡconveingenzyme,ACEⅡELISA試劑盒大鼠血管緊張素Ⅱ轉(zhuǎn)化酶(ACEⅡ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Sulforhodaminep磺酰羅丹明B細(xì)胞培養(yǎng)試劑染料100毫克BS 小鼠L苯解酶(PAL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
鈣500毫克RT 載脂蛋白L1(APOL1)ELISA試劑盒 ,英文名: APOL1 ELISA Kit
CoomassieR-250,Na 5g/10g/100ml Amresco分裝 Humanα-glathioneS-ansferases,α-GSTELISA試劑盒人α谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(α-GST)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
煙曲霉探針法熒光定量PCR試劑盒直銷牛肉粉shēng huà shì jì容量:500克 ELISAKitMMP-5小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶5規(guī)格:48T/96T
全脫輕酶 cLDqHYDq Dqxy7noGqNcSq FROM BcKqR S 908-88-0 Humanalpha-fetoproteinLensculinarisaggliin3,AFP-L3ELISAKit人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
環(huán)忻烯 Cyclooctqnq 931-88-4 人抗人類免疫缺陷病毒抗體(HIV)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝